Truenat® Dengue/Chikungunya

کیت Truenat® Dengue/Chikungunya مولبایو | تشخیص مولکولی تب دنگی و چیکونگونیا

معرفی کیت Truenat Dengue/Chikungunya

کیت Truenat® Dengue/Chikungunya محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون مولکولی مبتنی بر تراشه (Chip-Based Real-Time Duplex RT-PCR) است که برای شناسایی کمی و افتراق RNA ویروس‌های دنگی (Dengue Virus) و چیکونگونیا (Chikungunya Virus) در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان طراحی شده است.

این کیت با استفاده از فناوری Real-Time RT-PCR و شیمی TaqMan، امکان بررسی هم‌زمان دو عامل مهم بیماری‌های ویروسی منتقله از طریق پشه را فراهم می‌کند.

از آنجا که تب دنگی و چیکونگونیا ممکن است با علائم بالینی مشابه ظاهر شوند، تشخیص افتراقی مولکولی این دو عفونت می‌تواند در ارزیابی آزمایشگاهی بیماران مشکوک و مدیریت بیماری اهمیت داشته باشد.

ویروس دنگی و بیماری تب دنگی چیست؟

ویروس دنگی از خانواده Flaviviridae است و عمدتاً از طریق گزش پشه‌های آلوده از جنس Aedes، به‌ویژه Aedes aegypti و Aedes albopictus، منتقل می‌شود.

ویروس دنگی دارای چهار سروتیپ اصلی است:

DENV-1

DENV-2

DENV-3

DENV-4

عفونت دنگی می‌تواند بدون علامت باشد یا با تب، سردرد، درد عضلانی، درد مفاصل، تهوع و بثورات پوستی همراه شود.

در برخی بیماران، بیماری ممکن است به شکل شدید همراه با نشت پلاسما، خونریزی یا اختلال عملکرد اندام‌ها بروز کند.

اهمیت تشخیص مولکولی دنگی

در مرحله حاد عفونت، شناسایی RNA ویروس دنگی می‌تواند به تأیید آزمایشگاهی بیماری کمک کند.

در کیت Truenat Dengue/Chikungunya، ناحیه ژنتیکی هدف برای دنگی به‌گونه‌ای انتخاب شده است که چهار سروتیپ اصلی ویروس را پوشش دهد.

این ویژگی به معنای شناسایی ویروس دنگی است، نه گزارش جداگانه سروتیپ‌های DENV-1 تا DENV-4.

ویروس چیکونگونیا و بیماری Chikungunya چیست؟

ویروس چیکونگونیا از خانواده Togaviridae و جنس Alphavirus است و عمدتاً از طریق گزش پشه‌های آلوده Aedes منتقل می‌شود.

عفونت چیکونگونیا معمولاً با شروع ناگهانی تب و درد مفاصل همراه است.

از علائم احتمالی آن می‌توان به موارد زیر اشاره کرد:

تب

درد شدید مفاصل

درد عضلانی

سردرد

خستگی

بثورات پوستی

درد مفاصل در برخی بیماران ممکن است برای هفته‌ها یا ماه‌ها ادامه پیدا کند.

اهمیت تشخیص مولکولی چیکونگونیا

در مرحله حاد بیماری، شناسایی RNA ویروس چیکونگونیا می‌تواند به تشخیص عفونت کمک کند.

کیت Truenat Dengue/Chikungunya برای شناسایی اختصاصی این ویروس، ژن nsP4 را هدف قرار می‌دهد.

چرا تشخیص افتراقی دنگی و چیکونگونیا اهمیت دارد؟

این دو عفونت در برخی مناطق جغرافیایی به‌صورت هم‌زمان گردش دارند و ناقلان مشترکی دارند.

علائمی مانند تب، سردرد، درد عضلانی، درد مفاصل و بثورات پوستی می‌توانند در هر دو بیماری دیده شوند.

با وجود شباهت‌های بالینی، پیامدهای بیماری و ملاحظات درمانی آن‌ها یکسان نیست.

به‌عنوان مثال، در بیمار مشکوک به دنگی، ارزیابی خطر خونریزی و علائم هشداردهنده اهمیت ویژه‌ای دارد.

یک آزمون مولکولی ترکیبی می‌تواند به شناسایی عامل عفونت کمک کند و در صورت وجود هر دو ویروس در نمونه، امکان بررسی هم‌زمان آن‌ها را فراهم سازد.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat Dengue/Chikungunya

۱. تشخیص هم‌زمان دو ویروس

کیت از فناوری Duplex RT-PCR برای بررسی هم‌زمان ویروس دنگی و چیکونگونیا استفاده می‌کند.

۲. نیاز به حجم کم محلول استخراج‌شده

برای انجام واکنش مولکولی تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

۳. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

طبق اطلاعات فعلی صفحه رسمی سازنده، مدت‌زمان کل فرایند از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است.

۴. شناسایی کمی

نوع آزمون Quantitative Detection است و برای شناسایی کمی اهداف ویروسی طراحی شده است.

۵. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

تراشه و اقلام مصرفی اختصاصی آزمون برای استفاده یک‌بارمصرف طراحی شده‌اند.

۶. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

طراحی تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول واکنش انجام شده است.

۷. معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

معرف‌های واکنش به‌صورت خشک‌شده انجمادی و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۸. پایداری تا دو سال

بر اساس اطلاعات سازنده، کیت در شرایط نگهداری توصیه‌شده تا دو سال پایداری دارد.

۹. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۱۰. فناوری TaqMan

آزمون از شیمی TaqMan برای شناسایی مولکولی اهداف ویروسی استفاده می‌کند.

مشخصات فنی کیت Truenat Dengue/Chikungunya

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction in Trueprep AUTO v2

استخراج خودکار RNA با استفاده از فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time RT-PCR Based on TaqMan Chemistry

آزمون مبتنی بر PCR در زمان واقعی همراه با رونویسی معکوس و شیمی TaqMan است.

نوع آزمون (Assay Type)

Quantitative Detection — شناسایی کمی

زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

نمونه‌های بالینی (Clinical Specimen)

خون انسان (Human Blood)

پلاسمای انسان (Human Plasma)

سرم انسان (Human Serum)

ژن هدف ویروس دنگی (Dengue Gene Target)

3′ Untranslated Region – 3′ UTR

بخشی از ناحیه ترجمه‌نشونده انتهای ۳′ ژنوم ویروس دنگی.

طبق دستورالعمل محصول، ناحیه انتخاب‌شده برای شناسایی هر چهار سروتیپ اصلی دنگی طراحی شده است.

ژن هدف ویروس چیکونگونیا (Chikungunya Gene Target)

Nonstructural Protein 4 Gene – nsP4

ژن کدکننده پروتئین غیرساختاری شماره ۴ در ژنوم ویروس چیکونگونیا.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش عملکرد مراحل آزمون.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

ویروس دنگی:

139.76 copies/mL

ویروس چیکونگونیا:

180.45 copies/mL

این مقادیر مربوط به حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده توسط شرکت سازنده هستند.

حساسیت و ویژگی تشخیصی

در بخش مشخصات فنی صفحه رسمی این محصول، عدد مستقلی برای حساسیت و ویژگی تشخیصی درج نشده است.

بنابراین از نسبت دادن مقادیر ۱۰۰ درصد یا سایر اعداد تأییدنشده به این کیت خودداری می‌شود.

برای بررسی عملکرد بالینی باید به داده‌های اعتبارسنجی و آخرین نسخه IFU مراجعه شود.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

پایداری کیت (Shelf Life)

۲ سال در شرایط نگهداری توصیه‌شده.

تاریخ انقضای درج‌شده روی بسته‌بندی محصول ملاک نهایی استفاده است.

محتویات کیت Truenat Dengue/Chikungunya

هر بسته تکی مهروموم‌شده مطابق اطلاعات رسمی سازنده شامل اقلام زیر است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® Dengue/Chikungunya Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی برای اجرای آزمون Duplex RT-PCR.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

Microtube with Freeze-Dried RT-PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی موردنیاز واکنش.

۳. نوک سمپلر فاقد DNase و RNase

DNase & RNase-Free Pipette Tip

نوک سمپلر برای انتقال محلول استخراج‌شده.

۴. بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

برای کمک به حفظ شرایط مناسب نگهداری محتویات بسته.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601040005

بسته ۲۰ تستی

تعداد تست: 20T

شماره کاتالوگ: 601040020

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601040025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601040050

در نسخه‌ای از دستورالعمل محصول، بسته‌های ۱۰۰ و ۲۰۰ تستی نیز ذکر شده‌اند؛ اما برای سفارش باید موجود بودن آن‌ها و فهرست بسته‌بندی فعلی با شرکت سازنده بررسی شود.

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

بسته پیش‌تیمار نمونه Trueprep AUTO

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای آماده‌سازی اولیه نمونه پیش از استخراج RNA.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی با دستگاه Trueprep AUTO v2.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار ماده ژنتیکی مبتنی بر فناوری میکروفلوئیدیک و کارتریج.

دستگاه‌های Real-Time PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها برای اجرای آزمون‌های مبتنی بر تراشه Truenat طراحی شده‌اند.

تفاوت کیت ترکیبی Dengue/Chikungunya با کیت‌های اختصاصی

Truenat Dengue/Chikungunya

برای شناسایی کمی و افتراق هم‌زمان RNA ویروس دنگی و ویروس چیکونگونیا طراحی شده است.

Truenat Dengue

برای شناسایی اختصاصی RNA ویروس دنگی کاربرد دارد.

Truenat Chikungunya

برای شناسایی اختصاصی RNA ویروس چیکونگونیا استفاده می‌شود.

انتخاب آزمون ترکیبی یا اختصاصی باید بر اساس هدف تشخیصی، وضعیت بیمار، امکانات آزمایشگاهی و دستورالعمل سازنده انجام شود.

کاربرد کیت در آزمایشگاه‌های تشخیص مولکولی

کیت Truenat Dengue/Chikungunya می‌تواند در آزمایشگاه‌های مجهز به پلتفرم Molbio برای موارد زیر استفاده شود:

کمک به تشخیص مولکولی عفونت دنگی

کمک به تشخیص مولکولی عفونت چیکونگونیا

تشخیص افتراقی دو عفونت با علائم مشابه

بررسی نمونه‌های بیماران مشکوک در مناطق دارای گردش هر دو ویروس

پشتیبانی از پایش آزمایشگاهی بیماری‌ها در محدوده کاربرد تأییدشده آزمون

نتایج باید همراه با علائم بالینی، زمان شروع بیماری،سابقه سفر و سایر یافته‌های آزمایشگاهی تفسیر شوند.

نتیجه منفی به‌تنهایی عفونت را در تمام مراحل بیماری رد نمی‌کند؛ زیرا میزان RNA ویروس ممکن است با گذشت زمان تغییر کند.

جمع‌بندی

کیت Truenat® Dengue/Chikungunya شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time Duplex RT-PCR برای شناسایی و افتراق ویروس‌های دنگی و چیکونگونیا در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان است.

این آزمون برای ویروس دنگی، ناحیه 3′ UTR و برای ویروس چیکونگونیا، ژن nsP4 را هدف قرار می‌دهد.

طبق اطلاعات رسمی سازنده، زمان کل آزمون ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای اجرای واکنش نیاز دارد.

حد تشخیص اعلام‌شده برای دنگی 139.76 copies/mL و برای چیکونگونیا 180.45 copies/mL است.

معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار RNA و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از دیگر ویژگی‌های این محصول هستند.

کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی معرفی شده و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab سازگار است.