Truenat® Chikungunya

کیت Truenat Chikungunya مولبایو | تشخیص مولکولی و کمی ویروس چیکونگونیا

معرفی کیت Truenat Chikungunya

کیت Truenat® Chikungunya محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون تشخیص مولکولی مبتنی بر تراشه (Chip-Based Real-Time RT-PCR) است که برای شناسایی کمی RNA ویروس چیکونگونیا (Chikungunya Virus – CHIKV) در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان طراحی شده است.

این کیت با استفاده از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan و هدف قرار دادن ژن Non-Structural Protein 4 (nsP4) در ژنوم ویروس چیکونگونیا، به تشخیص آزمایشگاهی عفونت کمک می‌کند.

کیت Truenat Chikungunya بخشی از پلتفرم تشخیص مولکولی Truenat است و در کنار دستگاه استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های سازگار Truelab استفاده می‌شود.

بر اساس مشخصات شرکت سازنده، مدت‌زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است و برای اجرای واکنش مولکولی تنها ۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

ویروس چیکونگونیا چیست؟

ویروس چیکونگونیا یک ویروس RNAدار از خانواده Togaviridae و جنس Alphavirus است که عمدتاً از طریق گزش پشه‌های آلوده جنس Aedes به انسان منتقل می‌شود.

دو گونه مهم پشه در انتقال این ویروس عبارت‌اند از:

Aedes aegypti

Aedes albopictus

این پشه‌ها در انتقال برخی دیگر از بیماری‌های ویروسی از جمله دنگی و زیکا نیز نقش دارند.

عفونت چیکونگونیا معمولاً با تب ناگهانی و درد قابل‌توجه مفاصل همراه است. در برخی بیماران، علائم مفصلی ممکن است پس از پایان مرحله حاد بیماری نیز ادامه پیدا کنند.

علائم بالینی بیماری چیکونگونیا

علائم عفونت چیکونگونیا ممکن است از خفیف تا شدید متغیر باشند.

مهم‌ترین علائم احتمالی عبارت‌اند از:

تب با شروع ناگهانی

درد شدید مفاصل

تورم مفاصل

درد عضلانی

سردرد

خستگی و ضعف عمومی

بثورات پوستی

تهوع در برخی بیماران

درد مفاصل یکی از ویژگی‌های شاخص بیماری چیکونگونیا است و ممکن است در بعضی بیماران برای هفته‌ها یا ماه‌ها ادامه پیدا کند.

شدت بیماری و مدت ماندگاری علائم به عوامل مختلفی از جمله سن، وضعیت سلامت بیمار و پاسخ ایمنی بدن بستگی دارد.

پراکندگی جغرافیایی و اهمیت اپیدمیولوژیک چیکونگونیا

ویروس چیکونگونیا در مناطق مختلف جهان گزارش شده و انتقال آن با حضور ناقلان آلوده ارتباط دارد.

مناطق مهم درگیر شامل شبه‌قاره هند، جنوب شرق آسیا، بخش‌هایی از آفریقا، جزایر کارائیب و آمریکای مرکزی و جنوبی هستند.

گسترش جغرافیایی پشه‌های ناقل، سفرهای بین‌المللی و شرایط اقلیمی می‌توانند بر الگوی انتشار بیماری تأثیر بگذارند.

در مناطق دارای گردش هم‌زمان ویروس‌های دنگی و چیکونگونیا، استفاده از روش‌های تشخیص افتراقی اهمیت بیشتری پیدا می‌کند.

اهمیت تشخیص مولکولی چیکونگونیا

علائم چیکونگونیا ممکن است با سایر عفونت‌های تب‌دار، به‌ویژه دنگی و زیکا، شباهت داشته باشند.

به همین دلیل، تشخیص بیماری صرفاً بر اساس علائم بالینی همیشه امکان‌پذیر نیست.

روش‌های مولکولی مبتنی بر Real-Time RT-PCR با شناسایی مستقیم RNA ویروس می‌توانند به تأیید آزمایشگاهی عفونت، به‌ویژه در مرحله حاد بیماری، کمک کنند.

در مراحل اولیه عفونت، زمانی که RNA ویروس در خون قابل شناسایی است، آزمایش‌های مولکولی می‌توانند نقش مهمی در تشخیص داشته باشند.

با گذشت زمان و کاهش میزان ویروس در گردش خون، ممکن است استفاده از روش‌های سرولوژیک نیز برای ارزیابی بیمار ضروری شود.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat Chikungunya

۱. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

برای انجام واکنش مولکولی تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

این مقدار مربوط به حجم ورودی واکنش PCR است و نباید با حجم نمونه خون اولیه اشتباه گرفته شود.

۲. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

مدت‌زمان اعلام‌شده توسط سازنده از نمونه تا نتیجه (Sample-to-Result) برابر ۶۰ دقیقه است.

۳. تشخیص کمی ویروس چیکونگونیا

نوع آزمون Quantitative Detection است و برای شناسایی کمی RNA ویروس چیکونگونیا طراحی شده است.

گزارش کمی باید مطابق محدوده عملکرد و دستورالعمل رسمی آزمون تفسیر شود.

۴. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

کیت از مواد مصرفی اختصاصی و یک‌بارمصرف استفاده می‌کند.

۵. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

طراحی تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول فرایند آزمون انجام شده است.

۶. معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

معرف‌های واکنش به‌صورت خشک‌شده انجمادی (Lyophilized) و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۷. پایداری معرف‌ها تا دو سال

طبق اعلام سازنده، معرف‌ها در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد تا دو سال پایداری دارند.

۸. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۹. فناوری پیشرفته TaqMan

آزمون از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan استفاده می‌کند.

۱۰. طراحی اختصاصی پرایمرها

شرکت سازنده، حساسیت و اختصاصیت بالای طراحی پرایمرها را از ویژگی‌های این آزمون معرفی می‌کند.

این ویژگی نباید با حساسیت و ویژگی تشخیصی صددرصدی در تمام شرایط بالینی یکسان در نظر گرفته شود.

مشخصات فنی کیت Truenat Chikungunya

نام تجاری محصول

Truenat® Chikungunya

شرکت سازنده

Molbio Diagnostics

عامل بیماری‌زای هدف

Chikungunya Virus (CHIKV)

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction in Trueprep AUTO v2

استخراج خودکار ماده ژنتیکی با استفاده از فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time RT-PCR Based on TaqMan Chemistry

آزمون برای شناسایی RNA ویروس چیکونگونیا از روش رونویسی معکوس و PCR در زمان واقعی استفاده می‌کند.

نوع آزمون (Assay Type)

Quantitative Detection – شناسایی کمی

زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

حجم محلول استخراج‌شده

۶ میکرولیتر (6 µL)

نمونه‌های بالینی (Clinical Specimen)

نمونه‌های قابل استفاده شامل موارد زیر هستند:

خون انسان (Human Blood)

سرم انسان (Human Serum)

پلاسمای انسان (Human Plasma)

نوع لوله نمونه‌گیری، شرایط انتقال و زمان مجاز نگهداری نمونه باید مطابق دستورالعمل رسمی سازنده انتخاب شود.

ژن هدف (Gene Target)

Non-Structural Protein 4 (nsP4) Gene

ژن nsP4 بخشی از ژنوم ویروس چیکونگونیا است و پروتئینی مرتبط با مجموعه همانندسازی RNA ویروس را کد می‌کند.

این ژن به‌عنوان هدف مولکولی برای شناسایی اختصاصی ویروس چیکونگونیا در کیت Truenat Chikungunya انتخاب شده است.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

153.57 copies/mL

این مقدار حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده توسط شرکت Molbio Diagnostics است.

حد تشخیص نشان‌دهنده عملکرد تحلیلی آزمون در شرایط ارزیابی است و به‌تنهایی معادل حساسیت تشخیصی در تمام جمعیت‌های بالینی نیست.

حساسیت و ویژگی تشخیصی

در مشخصات منتشرشده در صفحه رسمی محصول، مقدار عددی مستقلی برای حساسیت تشخیصی (Sensitivity) و ویژگی تشخیصی (Specificity) درج نشده است.

برای اعلام این شاخص‌ها باید به داده‌های اعتبارسنجی اختصاصی و آخرین نسخه دستورالعمل رسمی استفاده مراجعه شود.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

پایداری معرف‌ها (Shelf Life)

تا دو سال در شرایط نگهداری توصیه‌شده توسط شرکت سازنده.

تاریخ انقضای درج‌شده روی بسته‌بندی ملاک نهایی استفاده از محصول است.

محتویات کیت Truenat Chikungunya

بر اساس اطلاعات رسمی شرکت Molbio Diagnostics، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل چهار جزء اصلی است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® Chikungunya Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی برای اجرای آزمون مولکولی و شناسایی ویروس چیکونگونیا.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

Microtube with Freeze-Dried RT-PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی موردنیاز واکنش.

۳. نوک سمپلر فاقد DNase و RNase

DNase & RNase-Free Pipette Tip

نوک سمپلر برای انتقال محلول استخراج‌شده.

۴. بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

برای کمک به حفظ شرایط مناسب نگهداری محتویات بسته.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

کیت Truenat Chikungunya در بسته‌بندی‌های زیر توسط شرکت Molbio Diagnostics معرفی شده است.

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601060005

بسته ۲۰ تستی

تعداد تست: 20T

شماره کاتالوگ: 601060020

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601060025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601060050

برای ثبت سفارش، موجودی بسته‌ها و مشخصات محصول باید با اطلاعات تجاری به‌روز شرکت سازنده تطبیق داده شود.

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

علاوه بر محتویات اختصاصی کیت، شرکت سازنده مواد مصرفی زیر را برای اجرای آزمون معرفی کرده است.

بسته پیش‌تیمار عمومی نمونه Trueprep AUTO

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

این بسته برای آماده‌سازی اولیه نمونه پیش از استخراج ماده ژنتیکی استفاده می‌شود.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی Trueprep AUTO v2

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

این کیت برای آماده‌سازی و استخراج خودکار ماده ژنتیکی در دستگاه Trueprep AUTO v2 به کار می‌رود.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه Trueprep AUTO v2

دستگاه Trueprep AUTO v2 برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی با استفاده از فناوری میکروفلوئیدیک و کارتریج طراحی شده است.

دستگاه‌های تشخیص مولکولی Truelab

کیت Truenat Chikungunya با دستگاه‌های زیر از خانواده Truelab سازگار است:

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها برای اجرای واکنش‌های PCR مبتنی بر تراشه Truenat استفاده می‌شوند.

تفاوت Truenat Chikungunya با Truenat Dengue/Chikungunya

کیت Truenat Chikungunya

این محصول برای شناسایی اختصاصی RNA ویروس چیکونگونیا طراحی شده است.

ژن هدف آن nsP4 است و حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده برای آن 153.57 copies/mL است.

کیت Truenat Dengue/Chikungunya

این محصول یک آزمون ترکیبی Duplex Real-Time RT-PCR برای شناسایی هم‌زمان ویروس دنگی و چیکونگونیا است.

حد تشخیص اعلام‌شده برای ویروس چیکونگونیا در کیت ترکیبی 180.45 copies/mL و برای ویروس دنگی 139.76 copies/mL است.

تفاوت مقادیر حد تشخیص تحلیلی به‌تنهایی به معنای برتری عملکرد بالینی یکی از دو کیت نیست.

انتخاب آزمون مناسب باید بر اساس هدف تشخیصی، شرایط بیمار و دستورالعمل‌های آزمایشگاهی انجام شود.

کاربرد کیت Truenat Chikungunya در آزمایشگاه‌های تشخیص مولکولی

این کیت می‌تواند در آزمایشگاه‌های مجهز به پلتفرم Molbio برای کمک به تشخیص مولکولی عفونت چیکونگونیا مورد استفاده قرار گیرد.

کاربردهای آن شامل بررسی نمونه‌های بیماران مشکوک به عفونت، شناسایی RNA ویروس در مرحله مناسب بیماری و کمک به تشخیص افتراقی عفونت‌های تب‌دار است.

در مناطق دارای گردش ویروس‌های منتقله از طریق پشه، تشخیص اختصاصی چیکونگونیا می‌تواند به تکمیل بررسی آزمایشگاهی بیمار کمک کند.

نتیجه آزمون باید همراه با علائم بالینی، زمان شروع بیماری، سابقه سفر و سایر یافته‌های آزمایشگاهی تفسیر شود.

نتیجه منفی Real-Time RT-PCR به‌تنهایی وجود عفونت چیکونگونیا را در تمام مراحل بیماری رد نمی‌کند؛ زیرا مقدار RNA ویروس در خون ممکن است با گذشت زمان کاهش پیدا کند.

جمع‌بندی

کیت Truenat® Chikungunya محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time RT-PCR است که برای شناسایی RNA ویروس چیکونگونیا در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان طراحی شده است.

این آزمون ژن nsP4 را هدف قرار می‌دهد و با استفاده از فناوری TaqMan انجام می‌شود.

بر اساس اطلاعات رسمی سازنده، مدت‌زمان کل آزمون ۶۰ دقیقه است و برای اجرای واکنش تنها ۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده برای این کیت 153.57 copies/mL است.

از دیگر ویژگی‌های محصول می‌توان به معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار RNA و امکان نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد اشاره کرد.

کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی عرضه می‌شود و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab Uno Dx، Truelab Duo و Truelab Quattro سازگار است.

Truenat Chikungunya یکی از محصولات تخصصی خانواده Truenat برای تشخیص مولکولی بیماری‌های منتقله از طریق ناقل است و می‌تواند در چارچوب کاربرد تأییدشده سازنده به بررسی آزمایشگاهی عفونت چیکونگونیا کمک کند.