Truenat® Malaria Pv/Pf

کیت Truenat® Malaria Pv/Pf مولبایو | تشخیص مولکولی و افتراقی مالاریا

معرفی کیت Truenat Malaria Pv/Pf

کیت Truenat® Malaria Pv/Pf محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون مولکولی مبتنی بر تراشه و فناوری Chip-Based Real-Time Duplex PCR برای شناسایی کمی و افتراق دو گونه مهم انگل مالاریا، یعنی Plasmodium vivax و Plasmodium falciparum، در نمونه خون انسان است.

این آزمون با شناسایی توالی‌های اختصاصی DNA انگل، به تشخیص افتراقی مالاریای ناشی از این دو گونه کمک می‌کند.

فناوری Duplex PCR امکان بررسی هر دو عامل بیماری‌زا را در یک آزمون فراهم می‌سازد. این ویژگی برای آزمایشگاه‌هایی که نیازمند تشخیص سریع و مولکولی مالاریا هستند، اهمیت دارد.

بیماری مالاریا و عوامل ایجادکننده آن

مالاریا یک بیماری انگلی است که عمدتاً از طریق گزش پشه ماده آلوده از جنس Anopheles به انسان منتقل می‌شود.

عامل بیماری، انگل‌های متعلق به جنس Plasmodium هستند. از میان گونه‌های آلوده‌کننده انسان، P. falciparum و P. vivax اهمیت بالینی و اپیدمیولوژیک زیادی دارند.

پلاسمودیوم فالسیپاروم (Plasmodium falciparum)

این گونه یکی از مهم‌ترین عوامل مالاریای شدید است و می‌تواند باعث عوارضی مانند کم‌خونی شدید، اختلال عملکرد اندام‌ها و مالاریای مغزی شود.

شناسایی به‌موقع این گونه به دلیل احتمال پیشرفت سریع بیماری اهمیت ویژه‌ای دارد.

پلاسمودیوم ویواکس (Plasmodium vivax)

این گونه از عوامل مهم مالاریا در مناطق مختلف آسیا، آمریکای لاتین و برخی مناطق دیگر جهان است.

P. vivax می‌تواند مراحل نهفته کبدی موسوم به هیپنوزوئیت ایجاد کند که ممکن است موجب عود بیماری در آینده شوند.

افتراق این دو گونه از نظر ارزیابی بالینی و انتخاب رویکرد درمانی اهمیت دارد.

پراکندگی جغرافیایی و بار جهانی مالاریا

مالاریا همچنان یکی از چالش‌های مهم سلامت عمومی در جهان است و بیشترین بار آن در مناطق گرمسیری و نیمه‌گرمسیری مشاهده می‌شود.

مناطق مهم درگیر شامل:

کشورهای آفریقای جنوب صحرا

بخش‌هایی از جنوب و جنوب شرق آسیا

مناطقی از آمریکای لاتین

برخی مناطق اقیانوسیه

طبق معرفی محصول توسط Molbio، سالانه بیش از ۲۰۰ میلیون مورد مالاریا در جهان رخ می‌دهد.

این رقم یک توصیف کلی از بار بیماری است و آمار دقیق سالانه باید از گزارش‌های به‌روز سازمان جهانی بهداشت استخراج شود.

اهمیت تشخیص مولکولی و افتراقی مالاریا

روش‌های متداول تشخیص مالاریا شامل میکروسکوپی اسمیر خون و تست‌های تشخیص سریع آنتی‌ژن (RDT) هستند.

روش‌های مولکولی مبتنی بر PCR با شناسایی DNA اختصاصی انگل می‌توانند به تشخیص و افتراق گونه‌های مالاریا کمک کنند.

کیت Truenat Malaria Pv/Pf با هدف شناسایی دو گونه P. vivax و P. falciparum طراحی شده است.

این آزمون برای تشخیص همه گونه‌های پلاسمودیوم طراحی نشده و نتیجه منفی آن به‌تنهایی وجود سایر گونه‌های عامل مالاریا را رد نمی‌کند.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat Malaria Pv/Pf

۱. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

برای انجام واکنش PCR، تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول نهایی استخراج‌شده موردنیاز است.

۲. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

مدت‌زمان اعلام‌شده از نمونه تا نتیجه (Sample-to-Result) برابر ۶۰ دقیقه است.

۳. شناسایی هم‌زمان دو گونه انگل

آزمون از فناوری Duplex PCR برای شناسایی و افتراق P. falciparum و P. vivax استفاده می‌کند.

۴. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

مواد مصرفی آزمون برای استفاده یک‌بارمصرف طراحی شده‌اند.

۵. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

طراحی تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول واکنش انجام شده است.

۶. معرف‌های PCR لیوفیلیزه

معرف‌های PCR به‌صورت خشک‌شده انجمادی (Freeze-Dried) و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۷. پایداری معرف‌ها تا دو سال

بر اساس اطلاعات سازنده، کیت در شرایط نگهداری توصیه‌شده تا دو سال پایداری دارد.

۸. نیازمندی‌های حداقلی ایمنی زیستی

Molbio نیازمندی‌های حداقلی ایمنی زیستی را از ویژگی‌های پلتفرم معرفی می‌کند.

بااین‌حال، نمونه خون انسان باید همواره مطابق دستورالعمل‌های ایمنی زیستی پردازش شود.

۹. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۱۰. فناوری پیشرفته TaqMan

آزمون از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan استفاده می‌کند.

مشخصات فنی کیت Truenat Malaria Pv/Pf

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction in Trueprep AUTO v2

استخراج DNA با استفاده از فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time PCR Based on TaqMan Chemistry

روش آزمون مبتنی بر PCR در زمان واقعی با شیمی TaqMan است.

نوع آزمون (Assay Typ

e)

Quantitative Detection — شناسایی کمی

این ویژگی امکان گزارش کمی مطابق الگوریتم و محدوده عملکرد معتبر آزمون را فراهم می‌کند.

مدت‌زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

نمونه بالینی (Clinical Specimen)

Human Blood Specimen — نمونه خون انسان

ژن هدف (Gene Target)

Erythrocyte Binding Protein Gene (EBP)

ژن کدکننده پروتئین اتصال به گلبول قرمز که در فرایند ورود انگل به گلبول قرمز نقش دارد.

ناحیه هدف برای شناسایی اختصاصی P. vivax و P. falciparum انتخاب شده است.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش صحت مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حساسیت تشخیصی (Sensitivity)

۱۰۰٪ (100%)

مطابق مقدار اعلام‌شده توسط شرکت سازنده.

ویژگی تشخیصی (Specificity)

۱۰۰٪ (100%)

مطابق مقدار اعلام‌شده توسط شرکت سازنده.

این مقادیر مربوط به ارزیابی‌های گزارش‌شده توسط سازنده هستند و به معنی تضمین عملکرد صددرصدی در تمام شرایط بالینی نیستند.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

Plasmodium falciparum (Pf):

1553 copies/mL

Plasmodium vivax (Pv):

2569 copies/mL

نکته فنی مهم: این حدود تشخیص بر اساس DNA پلاسمیدی اعلام شده‌اند؛ بنابراین نباید مستقیماً به تعداد انگل در هر میکرولیتر خون تبدیل شوند.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

محتویات کیت Truenat Malaria Pv/Pf

هر بسته تکی مهروموم‌شده طبق اطلاعات سازنده شامل موارد زیر است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® Malaria Pv/Pf Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی برای اجرای واکنش PCR و شناسایی گونه‌های هدف.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های PCR

Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های PCR خشک‌شده انجمادی.

۳. نوک سمپلر فاقد DNase و RNase

DNase & RNase-Free Pipette Tip

نوک سمپلر برای انتقال محلول استخراج‌شده.

۴. بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

در دستورالعمل بسته‌بندی محصول به بسته رطوبت‌گیر نیز اشاره شده است.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601010005

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601010025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601010050

نکته: در یکی از نسخه‌های دستورالعمل محصول، بسته ۲۰ تستی با شماره 601010020 نیز ذکر شده است؛ اما در فهرست سفارش فعلی صفحه رسمی Molbio، بسته‌های ۵، ۲۵ و ۵۰ تستی نمایش داده می‌شوند. بنابراین موجود بودن بسته ۲۰ تستی باید پیش از سفارش از سازنده استعلام شود.

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

بسته پیش‌تیمار نمونه Trueprep AUTO

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای آماده‌سازی اولیه نمونه خون پیش از استخراج DNA.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی با دستگاه Trueprep AUTO v2.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار ماده ژنتیکی مبتنی بر فناوری کارتریجی و میکروفلوئیدیک.

دستگاه‌های PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها برای اجرای آزمون‌های مبتنی بر تراشه Truenat طراحی شده‌اند.

تفاوت Truenat Malaria Pv/Pf با تست‌های سریع مالاریا

تست‌های سریع مالاریا معمولاً با شناسایی آنتی‌ژن‌های انگل در نمونه خون عمل می‌کنند.

در مقابل، کیت Truenat Malaria Pv/Pf از فناوری Real-Time PCR برای شناسایی DNA اختصاصی P. falciparum و P. vivax استفاده می‌کند.

مزیت مهم این آزمون، شناسایی مولکولی و افتراق دو گونه هدف است.

بااین‌حال، انتخاب بین میکروسکوپی، RDT و PCR به شرایط بیمار، امکانات آزمایشگاهی، زمان موردنیاز و دستورالعمل‌های بالینی بستگی دارد.

کاربردهای کیت در آزمایشگاه‌های تشخیص مولکولی

کیت Truenat Malaria Pv/Pf می‌تواند در آزمایشگاه‌های مجهز به پلتفرم Molbio برای موارد زیر استفاده شود:

کمک به تشخیص مولکولی مالاریا

افتراق P. vivax و P. falciparum

بررسی نمونه خون افراد مشکوک به مالاریا

پشتیبانی از مطالعات و برنامه‌های پایش بیماری، در محدوده کاربرد تأییدشده آزمون

نتیجه آزمایش باید در کنار علائم بالینی، سابقه سفر، یافته‌های آزمایشگاهی و سایر روش‌های تشخیصی تفسیر شود.

جمع‌بندی

کیت Truenat® Malaria Pv/Pf شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time Duplex PCR برای شناسایی و افتراق دو گونه مهم عامل مالاریا، یعنی Plasmodium falciparum و Plasmodium vivax، در نمونه خون انسان است.

این آزمون ژن EBP را هدف قرار می‌دهد و با استفاده از فناوری TaqMan انجام می‌شود.

بر اساس اطلاعات رسمی سازنده، زمان آزمون ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده برای واکنش نیاز دارد.

حد تشخیص اعلام‌شده برای P. falciparum برابر 1553 copies/mL و برای P. vivax برابر 2569 copies/mL است.

از دیگر ویژگی‌های این محصول می‌توان به معرف‌های PCR لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار DNA و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد اشاره کرد.

کیت در فهرست رسمی فعلی در بسته‌های ۵، ۲۵ و ۵۰ تستی معرفی شده است و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab سازگار است.