Truenat® Dengue

کیت Truenat® Dengue مولبایو | تشخیص مولکولی و کمی ویروس دنگی

معرفی کیت Truenat Dengue

کیت Truenat® Dengue محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون تشخیص مولکولی مبتنی بر تراشه (Chip-Based Real-Time RT-PCR) است که برای شناسایی کمی RNA ویروس دنگی (Dengue Virus) در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان طراحی شده است.

این آزمون با استفاده از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan و شناسایی ناحیه اختصاصی 3′ Untranslated Region یا 3′ UTR از ژنوم ویروس دنگی، به تشخیص آزمایشگاهی عفونت دنگی کمک می‌کند.

کیت Truenat Dengue بخشی از پلتفرم تشخیص مولکولی Truenat شرکت Molbio است که از سیستم استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های آنالیز مولکولی Truelab بهره می‌برد.

آشنایی با ویروس دنگی و بیماری تب دنگی

ویروس دنگی (DENV) یک ویروس RNAدار از خانواده Flaviviridae است که عمدتاً از طریق گزش پشه‌های آلوده جنس Aedes، به‌ویژه Aedes aegypti و Aedes albopictus، به انسان منتقل می‌شود.

چهار سروتیپ شناخته‌شده اصلی ویروس دنگی عبارت‌اند از:

DENV-1

DENV-2

DENV-3

DENV-4

عفونت با هر یک از این سروتیپ‌ها می‌تواند موجب تب دنگی شود.

علائم بیماری ممکن است شامل تب بالا، سردرد، درد پشت چشم، درد عضلات و مفاصل، تهوع و بثورات پوستی باشد.

در برخی بیماران، دنگی می‌تواند به بیماری شدید همراه با خونریزی، نشت پلاسما یا اختلال عملکرد اندام‌ها پیشرفت کند.

اهمیت تشخیص مولکولی ویروس دنگی

تشخیص آزمایشگاهی دنگی می‌تواند بر اساس روش‌های مختلفی از جمله شناسایی RNA ویروس، آنتی‌ژن NS1 یا آنتی‌بادی‌های اختصاصی انجام شود.

روش Real-Time RT-PCR با شناسایی مستقیم RNA ویروس، به‌ویژه در مرحله حاد و دوره حضور ویروس در خون، کاربرد دارد.

از آنجا که علائم دنگی ممکن است با عفونت‌هایی مانند چیکونگونیا، زیکا و برخی بیماری‌های تب‌دار دیگر مشابه باشد، شناسایی مولکولی عامل بیماری می‌تواند به تشخیص افتراقی کمک کند.

کیت Truenat Dengue برای شناسایی ویروس دنگی طراحی شده و به‌تنهایی سایر عوامل بیماری‌های تب‌دار را بررسی نمی‌کند.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat Dengue

۱. نیاز به حجم کم محلول استخراج‌شده

برای اجرای واکنش مولکولی تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

۲. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

مدت‌زمان کل فرایند از نمونه تا نتیجه (Sample-to-Result) طبق اعلام سازنده ۶۰ دقیقه است.

۳. شناسایی کمی RNA ویروس

نوع آزمون Quantitative Detection است و برای شناسایی کمی RNA ویروس دنگی طراحی شده است.

۴. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

تراشه و مواد مصرفی اختصاصی آزمون برای استفاده یک‌بارمصرف طراحی شده‌اند.

۵. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

ساختار تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول واکنش طراحی شده است.

۶. معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

معرف‌های واکنش به‌صورت خشک‌شده انجمادی (Lyophilized) ارائه می‌شوند.

۷. پایداری معرف‌ها تا دو سال

طبق اطلاعات سازنده، معرف‌ها در شرایط نگهداری توصیه‌شده و دمای حداکثر ۳۰ درجه سانتی‌گراد تا دو سال پایداری دارند.

۸. نیازمندی‌های حداقلی ایمنی زیستی

Molbio نیازمندی‌های حداقلی ایمنی زیستی را از ویژگی‌های پلتفرم معرفی می‌کند. بااین‌حال، رعایت دستورالعمل‌های ایمنی زیستی هنگام کار با نمونه خون انسان ضروری است.

۹. تراشه هوشمند با اطلاعات اختصاصی بچ تولید

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۱۰. فناوری TaqMan و طراحی اختصاصی پرایمرها

آزمون از شیمی TaqMan و طراحی پرایمرهای اختصاصی برای شناسایی هدف مولکولی استفاده می‌کند.

مشخصات فنی کیت Truenat Dengue

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction in Trueprep AUTO v2

استخراج خودکار RNA با فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time PCR Based on TaqMan Chemistry

روش اعلام‌شده توسط سازنده، Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan است. از نظر مولکولی، شناسایی RNA ویروس دنگی شامل مرحله رونویسی معکوس (RT) نیز می‌شود.

نوع آزمون (Assay Type)

Quantitative Detection — شناسایی کمی

مدت‌زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

نمونه‌های بالینی (Clinical Specimen)

خون انسان (Human Blood)

سرم انسان (Human Serum)

پلاسمای انسان (Human Plasma)

ژن یا ناحیه هدف (Gene Target)

3′ Untranslated Region (3′ UTR) of the Dengue Genome

ناحیه ترجمه‌نشونده انتهای ۳′ ژنوم ویروس دنگی.

این ناحیه بخشی از ژنوم RNA ویروس است که پروتئین کد نمی‌کند، اما در فرایندهای زیستی ویروس نقش دارد.

کیت برای شناسایی ویروس دنگی طراحی شده است؛ تعیین جداگانه سروتیپ‌های DENV-1 تا DENV-4 در مشخصات این آزمون اعلام نشده است.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

222.99 copies/mL

این مقدار حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده توسط شرکت Molbio Diagnostics است.

حساسیت و ویژگی تشخیصی (Sensitivity and Specificity)

در بخش مشخصات فنی رسمی این کیت، مقادیر عددی مستقلی برای حساسیت و ویژگی تشخیصی درج نشده است.

بنابراین برای جلوگیری از انتشار اطلاعات تأییدنشده، عددی برای این دو شاخص ذکر نمی‌شود.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

پایداری معرف‌ها (Shelf Life)

تا دو سال در شرایط نگهداری توصیه‌شده.

تاریخ انقضای درج‌شده روی بسته‌بندی ملاک نهایی استفاده است.

محتویات کیت Truenat Dengue

طبق اطلاعات رسمی شرکت Molbio، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل اقلام زیر است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® Dengue Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی اجرای آزمون مولکولی دنگی.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

Microtube with Freeze-Dried RT-PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی موردنیاز واکنش.

۳. نوک سمپلر فاقد DNase و RNase

DNase & RNase-Free Pipette Tip

نوک سمپلر برای انتقال محلول استخراج‌شده.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601050005

بسته ۲۰ تستی

تعداد تست: 20T

شماره کاتالوگ: 601050020

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601050025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601050050

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

بسته پیش‌تیمار نمونه Trueprep AUTO

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای آماده‌سازی اولیه نمونه پیش از استخراج RNA.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی در دستگاه Trueprep AUTO v2.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار ماده ژنتیکی با فناوری مبتنی بر کارتریج و میکروفلوئیدیک.

دستگاه‌های PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها بخشی از پلتفرم تشخیص مولکولی Truenat شرکت Molbio Diagnostics هستند.

تفاوت کیت Truenat Dengue با Truenat Dengue/Chikungunya

Truenat Dengue

آزمون اختصاصی برای شناسایی کمی RNA ویروس دنگی است.

ژن هدف آن ناحیه 3′ UTR ویروس دنگی و حد تشخیص اعلام‌شده آن 222.99 copies/mL است.

Truenat Dengue/Chikungunya

آزمون ترکیبی برای شناسایی کمی و افتراق هم‌زمان ویروس‌های دنگی و چیکونگونیا است.

این کیت علاوه بر ناحیه 3′ UTR دنگی، ژن nsP4 ویروس چیکونگونیا را نیز هدف قرار می‌دهد.

حد تشخیص اعلام‌شده برای دنگی در کیت ترکیبی 139.76 copies/mL و برای چیکونگونیا 180.45 copies/mL است.

تفاوت حدود تشخیص تحلیلی دو محصول لزوماً به معنی برتری عملکرد بالینی یکی بر دیگری نیست؛ مقایسه معتبر به شرایط یکسان مطالعه و داده‌های اعتبارسنجی نیاز دارد.

کاربردهای کیت در آزمایشگاه تشخیص مولکولی

کیت Truenat Dengue می‌تواند در آزمایشگاه‌های مجهز به پلتفرم Molbio برای موارد زیر به کار رود:

کمک به تشخیص مولکولی عفونت ویروس دنگی

بررسی نمونه خون، سرم یا پلاسمای بیماران مشکوک

شناسایی RNA ویروس در مرحله مناسب بیماری

پشتیبانی از پایش آزمایشگاهی دنگی در محدوده کاربرد تأییدشده آزمون

نتیجه باید همراه با علائم بالینی، زمان شروع بیماری، سابقه سفر و سایر یافته‌های آزمایشگاهی تفسیر شود.

نتیجه منفی RT-PCR به‌تنهایی عفونت دنگی را در تمام مراحل بیماری رد نمی‌کند؛ زیرا میزان RNA ویروس ممکن است با گذشت زمان کاهش یابد.

جمع‌بندی

کیت Truenat® Dengue شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time RT-PCR برای شناسایی RNA ویروس دنگی در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان است.

این آزمون ناحیه 3′ UTR ژنوم ویروس دنگی را هدف قرار می‌دهد.

طبق اطلاعات رسمی سازنده، مدت‌زمان کل آزمون ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای اجرای واکنش نیاز دارد.

حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده برای این کیت 222.99 copies/mL است.

معرف‌های لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار RNA و امکان نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از دیگر ویژگی‌های محصول هستند.

کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی عرضه می‌شود و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab سازگار است.