Truenat® HPV-HR

کیت Truenat HPV-HR مولبایو | تشخیص مولکولی ویروس پاپیلومای انسانی پرخطر

معرفی کیت Truenat HPV-HR

کیت Truenat® HPV-HR محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time Duplex PCR است که برای شناسایی نیمه‌کمی چهار ژنوتیپ پرخطر ویروس پاپیلومای انسانی (Human Papillomavirus یا HPV) طراحی شده است.

این کیت ژنوتیپ‌های HPV 16، HPV 18، HPV 31 و HPV 45 را در نمونه‌های دهانه رحم زنان که توسط کادر درمان جمع‌آوری شده‌اند، شناسایی می‌کند.

آزمون با استفاده از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan و هدف‌گیری نواحی اختصاصی ژن‌های E6 و E7 انجام می‌شود.

Truenat HPV-HR بخشی از پلتفرم تشخیص مولکولی Truenat است که از دستگاه استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های آنالیز مولکولی خانواده Truelab استفاده می‌کند.

از ویژگی‌های مهم این کیت می‌توان به زمان پاسخ‌دهی حدود ۶۰ دقیقه، استفاده از تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده، معرف‌های لیوفیلیزه و قابلیت نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد اشاره کرد.

ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) چیست؟

ویروس پاپیلومای انسانی گروهی از ویروس‌های DNAدار است که می‌توانند پوست و غشاهای مخاطی را آلوده کنند.

عفونت HPV یکی از شایع‌ترین عفونت‌های منتقله از طریق تماس جنسی است. بسیاری از افراد آلوده هیچ علامت مشخصی ندارند و عفونت ممکن است بدون نیاز به درمان اختصاصی ویروس برطرف شود.

بااین‌حال، عفونت پایدار با برخی ژنوتیپ‌های پرخطر HPV می‌تواند باعث تغییرات سلولی در دهانه رحم و افزایش خطر ضایعات پیش‌سرطانی و سرطان دهانه رحم شود.

HPV پرخطر همچنین با برخی سرطان‌های ناحیه مقعد، فرج، واژن، آلت تناسلی و دهان و حلق ارتباط دارد.

ژنوتیپ‌های تحت پوشش کیت Truenat HPV-HR

HPV 16

ژنوتیپ HPV 16 یکی از مهم‌ترین انواع سرطان‌زای HPV است و در بخش قابل‌توجهی از موارد سرطان دهانه رحم شناسایی می‌شود.

HPV 18

HPV 18 از دیگر ژنوتیپ‌های پرخطر اصلی است و ارتباط مهمی با سرطان دهانه رحم، از جمله برخی انواع آدنوکارسینوم، دارد.

HPV 31

ژنوتیپ HPV 31 از انواع پرخطر مرتبط با ضایعات پیش‌سرطانی و سرطان دهانه رحم است.

HPV 45

HPV 45 یکی دیگر از ژنوتیپ‌های سرطان‌زای HPV است که در غربالگری و ارزیابی عفونت‌های پرخطر اهمیت دارد.

نحوه افتراق ژنوتیپ‌ها

طبق اطلاعات سازنده، کیت Truenat HPV-HR در تشخیص افتراقی گروه‌های HPV 16/31 و HPV 18/45 کمک‌کننده است.

بنابراین نباید این آزمون را به‌عنوان روشی برای گزارش مستقل و جداگانه هر چهار ژنوتیپ معرفی کرد، مگر آنکه چنین قابلیتی در آخرین دستورالعمل رسمی محصول تأیید شده باشد.

اهمیت تشخیص HPV پرخطر

سرطان دهانه رحم یکی از سرطان‌هایی است که با واکسیناسیون HPV، غربالگری منظم و درمان به‌موقع ضایعات پیش‌سرطانی می‌توان از بسیاری از موارد آن پیشگیری کرد.

شناسایی HPV پرخطر به پزشکان کمک می‌کند افراد نیازمند پیگیری یا ارزیابی تکمیلی را بر اساس دستورالعمل‌های بالینی شناسایی کنند.

آزمایش مولکولی HPV DNA ماده ژنتیکی ویروس را مستقیماً بررسی می‌کند و با آزمایش پاپ اسمیر که تغییرات سلولی را ارزیابی می‌کند، تفاوت دارد.

وجود HPV پرخطر به‌تنهایی به معنای ابتلای فرد به سرطان نیست.

روش عملکرد کیت Truenat HPV-HR

این کیت از فناوری Real-Time Duplex PCR استفاده می‌کند.

در مرحله نخست، نمونه دهانه رحم با استفاده از مواد مصرفی مناسب آماده‌سازی می‌شود.

سپس استخراج DNA به کمک دستگاه Trueprep AUTO v2 و فناوری استخراج خودکار مبتنی بر کارتریج انجام می‌گیرد.

در مرحله بعد، ۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده به میکروتیوب حاوی معرف‌های PCR اضافه می‌شود.

محلول واکنش به تراشه اختصاصی Truenat HPV-HR منتقل شده و واکنش Real-Time PCR در دستگاه سازگار Truelab انجام می‌شود.

سیگنال‌های فلورسانس حاصل از شیمی TaqMan برای شناسایی اهداف مولکولی مورد استفاده قرار می‌گیرند.

ژن‌های هدف E6 و E7

این کیت نواحی مشخصی از ژن‌های E6 و E7 ژنوتیپ‌های پرخطر HPV را هدف قرار می‌دهد.

این ژن‌ها از نظر زیست‌شناسی مولکولی HPV اهمیت ویژه‌ای دارند؛ زیرا پروتئین‌های E6 و E7 در اختلال مسیرهای تنظیم چرخه سلولی و فرایندهای مرتبط با سرطان‌زایی نقش دارند.

مشخصات فنی کیت Truenat HPV-HR

نام محصول: Truenat® HPV-HR

شرکت سازنده: Molbio Diagnostics

عامل هدف: High-Risk Human Papillomavirus

ژنوتیپ‌های هدف: HPV 16، 18، 31 و 45

نوع ماده ژنتیکی: DNA

روش استخراج: Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction

دستگاه استخراج: Trueprep AUTO v2

روش آزمایش: Chip-Based Real-Time Duplex PCR

شیمی واکنش: TaqMan

نوع آزمون: Semi-Quantitative Detection

زمان آزمون: ۶۰ دقیقه

حجم محلول استخراج‌شده: ۶ میکرولیتر

نمونه بالینی: نمونه دهانه رحم زنان جمع‌آوری‌شده توسط کادر درمان

ژن‌های هدف: E6 و E7

کنترل داخلی: Internal Process Control – Extraction Control

حساسیت اعلام‌شده سازنده: 97.70%

ویژگی اعلام‌شده سازنده: 98.90%

دمای نگهداری: ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

پایداری معرف‌ها: تا دو سال در شرایط تعیین‌شده سازنده

حد تشخیص (Limit of Detection)

حد تشخیص یا LoD یکی از شاخص‌های عملکرد تحلیلی کیت‌های مولکولی است و کمترین غلظت هدف را که آزمون در شرایط مشخص اعتبارسنجی قادر به شناسایی آن است، نشان می‌دهد.

بر اساس مشخصات رسمی شرکت Molbio Diagnostics:

HPV 16

266.16 IU/mL

HPV 18

295.81 IU/mL

HPV 31

352.90 IU/mL

HPV 45

443.71 IU/mL

این مقادیر به هر ژنوتیپ اختصاص دارند و نباید به‌صورت یک حد تشخیص یکسان برای تمام انواع HPV گزارش شوند.

حساسیت و ویژگی آزمون

شرکت Molbio Diagnostics حساسیت ۹۷٫۷۰ درصد و ویژگی ۹۸٫۹۰ درصد را برای این محصول اعلام کرده است.

این مقادیر به عملکرد گزارش‌شده آزمون برای شناسایی HPV پرخطر مربوط هستند.

در ارزیابی بالینی باید میان شناسایی DNA ویروس و تشخیص ضایعات پیش‌سرطانی مانند CIN2+ یا CIN3+ تفاوت قائل شد.

مقادیر حساسیت و ویژگی اعلام‌شده برای تشخیص ویروس را نباید مستقیماً معادل عملکرد بالینی آزمون برای تشخیص سرطان یا ضایعات پیش‌سرطانی در نظر گرفت.

ده ویژگی اصلی کیت Truenat HPV-HR

۱. شناسایی چهار ژنوتیپ پرخطر HPV

پوشش ژنوتیپ‌های 16، 18، 31 و 45.

۲. تشخیص نیمه‌کمی

ارائه نتیجه مبتنی بر آزمون Semi-Quantitative بدون ادعای اندازه‌گیری مطلق بار ویروسی.

۳. فناوری Real-Time Duplex PCR

استفاده از روش مولکولی مبتنی بر تراشه و شیمی TaqMan.

۴. نتیجه در حدود ۶۰ دقیقه

زمان اعلام‌شده توسط سازنده برای فرایند نمونه تا نتیجه.

۵. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

کاهش حجم ماده استخراج‌شده موردنیاز برای واکنش.

۶. معرف‌های لیوفیلیزه آماده مصرف

معرف‌های PCR به‌صورت خشک‌شده انجمادی ارائه می‌شوند.

۷. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

استفاده از تراشه و اقلام مصرفی اختصاصی برای هر آزمون.

۸. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

ساختار تراشه برای کاهش خطر آلودگی و تبخیر طی واکنش طراحی شده است.

۹. تراشه هوشمند

تراشه حاوی اطلاعات اختصاصی بچ تولید است.

۱۰. پایداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

معرف‌ها در شرایط توصیه‌شده تا دو سال قابل نگهداری هستند.

محتویات کیت Truenat HPV-HR

هر بسته تکی مهروموم‌شده طبق مشخصات سازنده شامل موارد زیر است:

۱. تراشه اختصاصی PCR

Truenat HPV-HR Micro-PCR Chip

۲. میکروتیوب معرف

Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents

۳. نوک سمپلر فیلتر‌دار

DNase and RNase-Free Filter Barrier Microtip

۴. بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

مواد مصرفی موردنیاز

برای اجرای آزمایش، علاوه بر کیت اصلی، مواد مصرفی زیر موردنیاز هستند:

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

Trueprep AUTO Transport Medium for Swab Specimen

دستگاه‌های سازگار

Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار اسید نوکلئیک مبتنی بر کارتریج.

Truelab Uno Dx

دستگاه اجرای آزمون‌های Real-Time PCR روی تراشه‌های اختصاصی Truenat.

Truelab Duo

دستگاه تشخیص مولکولی سازگار با کیت‌های Truenat.

Truelab Quattro

از دیگر دستگاه‌های سازگار خانواده Truelab.

بسته‌بندی و شماره کاتالوگ

کیت Truenat HPV-HR در ظرفیت‌های مختلف عرضه می‌شود.

بسته ۵ تستی: 601220005

بسته ۲۰ تستی: 601220020

بسته ۲۵ تستی: 601220025

بسته ۵۰ تستی: 601220050

بسته ۱۰۰ تستی: 601220100

بسته ۲۰۰ تستی: 601220200

نکته مهم: جدول فعلی وب‌سایت سازنده برای ظرفیت‌های ۲۵ و ۵۰ تستی کد تکراری نشان می‌دهد. کدهای فوق بر اساس سند رسمی مجوز تولید منتشرشده توسط Molbio تنظیم شده‌اند. پیش از سفارش تجاری، موجودی و شماره کاتالوگ باید با سازنده تطبیق داده شود.

کاربردهای بالینی کیت Truenat HPV-HR

شناسایی عفونت HPV پرخطر

این کیت برای شناسایی DNA چهار ژنوتیپ پرخطر HPV در نمونه دهانه رحم طراحی شده است.

کمک به تشخیص افتراقی

آزمون در بررسی عفونت‌های علامت‌دار یا بدون علامت با ژنوتیپ‌های هدف کاربرد دارد.

کمک به ارزیابی خطر

شناسایی HPV پرخطر می‌تواند در کنار سایر اطلاعات بالینی به تعیین نیاز به پیگیری کمک کند.

پشتیبانی از خدمات تشخیص مولکولی

استفاده از پلتفرم Truenat امکان اجرای آزمون در آزمایشگاه‌های مجهز به دستگاه‌های سازگار را فراهم می‌کند.

کاربرد به‌عنوان آزمون غربالگری اولیه سرطان دهانه رحم باید بر اساس شواهد اعتبارسنجی بالینی، مجوزهای محصول و دستورالعمل‌های معتبر تعیین شود.

تفاوت Truenat HPV-HR با Truenat HPV-HR Plus

Truenat HPV-HR

چهار ژنوتیپ پرخطر 16، 18، 31 و 45 را شناسایی می‌کند.

اهداف مولکولی آن نواحی ژن‌های E6 و E7 هستند.

Truenat HPV-HR Plus

هشت ژنوتیپ پرخطر 16، 18، 31، 33، 35، 45، 52 و 58 را پوشش می‌دهد.

اهداف مولکولی آن نواحی ژن‌های L1 و E7 هستند.

بنابراین HPV-HR Plus از نظر تعداد ژنوتیپ‌های هدف، پوشش گسترده‌تری دارد؛ اما انتخاب کیت باید بر اساس کاربرد بالینی، عملکرد اعتبارسنجی‌شده و نیاز آزمایشگاه انجام شود.

تفاوت آزمایش HPV DNA با پاپ اسمیر

آزمایش HPV DNA با هدف شناسایی ماده ژنتیکی ویروس انجام می‌شود.

در مقابل، آزمایش پاپ اسمیر تغییرات سلولی دهانه رحم را بررسی می‌کند.

این دو آزمایش ممکن است در برنامه‌های غربالگری و پیگیری، بر اساس سن بیمار، سابقه آزمایش‌ها و دستورالعمل‌های بالینی به‌صورت مستقل یا مکمل استفاده شوند.

نکات مهم در تفسیر نتایج

نتیجه مثبت HPV پرخطر به معنای ابتلای قطعی به سرطان نیست.

بسیاری از عفونت‌های HPV بدون ایجاد ضایعه پایدار برطرف می‌شوند.

نتیجه منفی این کیت نیز عفونت با تمام ژنوتیپ‌های پرخطر HPV را رد نمی‌کند؛ زیرا آزمون فقط چهار ژنوتیپ مشخص را هدف قرار می‌دهد.

تشخیص قطعی ضایعات پیش‌سرطانی یا سرطان دهانه رحم به بررسی‌های تکمیلی مناسب، از جمله ارزیابی بافت‌شناسی در موارد ضروری، نیاز دارد.

جمع‌بندی

کیت Truenat® HPV-HR شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی نیمه‌کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time Duplex PCR است که برای شناسایی چهار ژنوتیپ پرخطر HPV شامل 16، 18، 31 و 45 در نمونه‌های دهانه رحم زنان طراحی شده است.

این آزمون نواحی ژن‌های E6 و E7 را هدف قرار می‌دهد و با استفاده از شیمی TaqMan، امکان شناسایی مولکولی ویروس را فراهم می‌کند.

زمان پاسخ‌دهی حدود ۶۰ دقیقه، نیاز به ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده، معرف‌های لیوفیلیزه و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از ویژگی‌های مهم محصول هستند.

کیت با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab Uno Dx، Truelab Duo و Truelab Quattro سازگار است.

Truenat HPV-HR می‌تواند در چارچوب کاربرد تأییدشده، به تشخیص مولکولی عفونت HPV پرخطر و تصمیم‌گیری برای ارزیابی‌های تکمیلی کمک کند.