Truenat® HBV

کیت Truenat HBV مولبایو | تشخیص مولکولی و اندازه‌گیری بار ویروسی هپاتیت B

معرفی کیت Truenat HBV

کیت Truenat® HBV محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون تشخیص مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time PCR است که برای شناسایی و اندازه‌گیری DNA ویروس هپاتیت B در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان طراحی شده است.

این کیت با استفاده از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan، بخشی از ناحیه Core/Pre-core ژنوم ویروس HBV را هدف قرار می‌دهد و به تشخیص مولکولی عفونت و تعیین بار ویروسی هپاتیت B کمک می‌کند.

اندازه‌گیری بار ویروسی HBV DNA یکی از شاخص‌های مهم آزمایشگاهی در ارزیابی بیماران مبتلا به هپاتیت B مزمن، تصمیم‌گیری درباره درمان و پایش پاسخ به داروهای ضدویروسی است.

کیت Truenat HBV بخشی از پلتفرم تشخیص مولکولی Truenat بوده و با دستگاه استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های سازگار Truelab مورد استفاده قرار می‌گیرد.

بر اساس مشخصات رسمی سازنده، زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای انجام واکنش PCR موردنیاز است.

ویروس هپاتیت B چیست؟

ویروس هپاتیت B یا Hepatitis B Virus (HBV) یک ویروس DNAدار از خانواده Hepadnaviridae است که سلول‌های کبد را آلوده می‌کند.

عفونت HBV ممکن است به‌صورت حاد یا مزمن بروز کند. در بسیاری از افراد، عفونت حاد بدون ایجاد بیماری مزمن برطرف می‌شود؛ اما در برخی بیماران، ویروس برای مدت طولانی در بدن باقی می‌ماند.

عفونت مزمن هپاتیت B می‌تواند در طول زمان باعث التهاب کبد، فیبروز، سیروز و افزایش خطر سرطان اولیه کبد (Hepatocellular Carcinoma) شود.

راه‌های انتقال ویروس هپاتیت B

ویروس HBV عمدتاً از طریق تماس با خون و مایعات بدن آلوده منتقل می‌شود.

راه‌های مهم انتقال عبارت‌اند از:

انتقال از مادر آلوده به نوزاد هنگام تولد

تماس جنسی محافظت‌نشده با فرد آلوده

استفاده مشترک از سرنگ یا وسایل تزریق

تماس با ابزار پزشکی یا وسایل تیز آلوده

تماس شغلی با خون آلوده

هپاتیت B از طریق تماس‌های معمول اجتماعی مانند دست دادن، در آغوش گرفتن یا غذا خوردن مشترک منتقل نمی‌شود.

واکسیناسیون یکی از مؤثرترین راه‌های پیشگیری از این عفونت است.

علائم بالینی هپاتیت B

بسیاری از افراد مبتلا، به‌ویژه در مرحله مزمن، ممکن است برای مدت طولانی بدون علامت باشند.

علائم احتمالی هپاتیت B عبارت‌اند از:

خستگی و ضعف عمومی

کاهش اشتها

تهوع و استفراغ

درد یا ناراحتی در ناحیه شکم

ادرار تیره

زردی پوست و چشم‌ها

درد مفاصل

نبود علائم بالینی به معنی نبود عفونت یا آسیب کبدی نیست.

اهمیت تشخیص مولکولی هپاتیت B

تشخیص و ارزیابی هپاتیت B بر اساس مجموعه‌ای از آزمایش‌های سرولوژیک، مولکولی و بررسی عملکرد کبد انجام می‌شود.

آزمایش‌هایی مانند HBsAg، Anti-HBs و Anti-HBc اطلاعات مهمی درباره وضعیت عفونت و ایمنی فرد ارائه می‌کنند.

در مقابل، آزمایش HBV DNA PCR مستقیماً ماده ژنتیکی ویروس را شناسایی می‌کند.

اندازه‌گیری کمی HBV DNA می‌تواند به ارزیابی میزان تکثیر ویروس و پایش تغییرات بار ویروسی در طول درمان کمک کند.

بار ویروسی HBV چیست؟

بار ویروسی یا HBV Viral Load بیانگر مقدار DNA ویروس هپاتیت B در حجم مشخصی از نمونه بالینی است.

نتایج آزمایش‌های کمی HBV DNA معمولاً بر حسب IU/mL گزارش می‌شوند.

تفسیر بار ویروسی باید همراه با وضعیت HBeAg، میزان ALT، وضعیت فیبروز کبد، سابقه درمان و سایر یافته‌های بالینی انجام شود.

بالا یا پایین بودن بار ویروسی به‌تنهایی برای تعیین شدت آسیب کبدی یا تصمیم‌گیری درباره شروع درمان کافی نیست.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat HBV

۱. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

برای انجام واکنش PCR تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

این مقدار مربوط به حجم ورودی واکنش بوده و با حجم نمونه خون اولیه متفاوت است.

۲. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

طبق اعلام سازنده، مدت‌زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است.

۳. اندازه‌گیری کمی HBV DNA

کیت برای Quantitative Detection طراحی شده و امکان برآورد بار ویروسی HBV را مطابق محدوده عملکرد معتبر آزمون فراهم می‌کند.

۴. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

تراشه و مواد مصرفی اختصاصی آزمون برای استفاده یک‌بارمصرف طراحی شده‌اند.

۵. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

ساختار تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول واکنش طراحی شده است.

۶. معرف‌های PCR لیوفیلیزه

معرف‌های واکنش به‌صورت خشک‌شده انجمادی و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۷. پایداری تا دو سال

طبق اطلاعات سازنده، کیت در شرایط نگهداری توصیه‌شده تا دو سال پایداری دارد.

۸. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۹. فناوری TaqMan

آزمون از شیمی TaqMan برای شناسایی DNA ویروس هپاتیت B استفاده می‌کند.

۱۰. طراحی اختصاصی پرایمرها

پرایمرها و پروب‌های آزمون برای شناسایی اختصاصی ناحیه هدف ژنوم HBV طراحی شده‌اند.

مشخصات فنی کیت Truenat HBV

نام تجاری محصول

Truenat® HBV

شرکت سازنده

Molbio Diagnostics

عامل بیماری‌زای هدف

Hepatitis B Virus (HBV)

ماده ژنتیکی هدف

HBV DNA

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction in Trueprep AUTO v2

استخراج خودکار ماده ژنتیکی با استفاده از فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time PCR Based on TaqMan Chemistry

این آزمون برای شناسایی DNA ویروس HBV از PCR در زمان واقعی استفاده می‌کند.

برخلاف ویروس‌های RNAدار مانند HCV، شناسایی DNA ویروس هپاتیت B به مرحله رونویسی معکوس نیاز ندارد.

نوع آزمون (Assay Type)

Quantitative Detection – شناسایی کمی

مدت‌زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

حجم محلول استخراج‌شده

۶ میکرولیتر (6 µL)

نمونه‌های بالینی (Clinical Specimen)

خون انسان (Human Blood)

سرم انسان (Human Serum)

پلاسمای انسان (Human Plasma)

شرایط نمونه‌گیری، انتقال و نگهداری باید مطابق آخرین دستورالعمل رسمی محصول رعایت شود.

ژن یا ناحیه هدف (Gene Target)

Part of the Core/Pre-core Region of the HBV Genome

آزمون بخشی از ناحیه Core/Pre-core ژنوم ویروس هپاتیت B را هدف قرار می‌دهد.

این ناحیه با پروتئین‌های مرتبط با ساختار نوکلئوکپسید و فرایندهای زیستی ویروس ارتباط دارد.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش صحت مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

55.92 IU/mL

این مقدار حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده توسط شرکت Molbio Diagnostics است.

حد تشخیص نشان‌دهنده پایین‌ترین سطحی از هدف است که آزمون در شرایط تعریف‌شده اعتبارسنجی می‌تواند با احتمال مشخص شناسایی کند.

این مقدار نباید با حد کمی‌سازی (Limit of Quantification – LoQ) یکسان در نظر گرفته شود.

حساسیت تشخیصی (Sensitivity)

۱۰۰٪

مطابق مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی شرکت سازنده.

ویژگی تشخیصی (Specificity)

۱۰۰٪

مطابق مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی شرکت سازنده.

این مقادیر مربوط به ارزیابی‌های گزارش‌شده توسط سازنده هستند و به معنای تضمین عملکرد صددرصدی در تمام شرایط بالینی نیستند.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

مدت پایداری (Shelf Life)

تا دو سال در شرایط نگهداری توصیه‌شده.

تاریخ انقضای درج‌شده روی بسته‌بندی ملاک نهایی استفاده از محصول است.

محتویات کیت Truenat HBV

بر اساس اطلاعات رسمی شرکت Molbio Diagnostics، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل موارد زیر است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® HBV Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی برای اجرای واکنش PCR و شناسایی DNA ویروس HBV.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های لیوفیلیزه

Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی موردنیاز واکنش.

۳. نوک سمپلر فاقد DNase و RNase

DNase & RNase-Free Pipette Tip

نوک سمپلر برای انتقال محلول استخراج‌شده به محیط واکنش.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

کیت Truenat HBV در بسته‌های زیر معرفی شده است.

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601090005

بسته ۲۰ تستی

تعداد تست: 20T

شماره کاتالوگ: 601090020

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601090025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601090050

برای ثبت سفارش، موجودی بسته‌ها و کدهای محصول باید با اطلاعات تجاری به‌روز سازنده تطبیق داده شود.

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

بسته پیش‌تیمار عمومی نمونه Trueprep AUTO

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای آماده‌سازی اولیه نمونه پیش از استخراج DNA.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی با دستگاه Trueprep AUTO v2.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار ماده ژنتیکی با فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج.

دستگاه‌های PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها برای اجرای آزمون‌های مولکولی مبتنی بر تراشه Truenat طراحی شده‌اند.

تفاوت آزمایش HBV DNA PCR با آزمایش HBsAg

آزمایش HBsAg

آزمایش HBsAg برای شناسایی آنتی‌ژن سطحی ویروس هپاتیت B استفاده می‌شود و یکی از آزمایش‌های اصلی در غربالگری و تشخیص عفونت HBV است.

آزمایش HBV DNA PCR

آزمایش HBV DNA PCR ماده ژنتیکی ویروس را مستقیماً شناسایی می‌کند.

در نوع کمی، این آزمایش برای اندازه‌گیری بار ویروسی و کمک به پایش روند عفونت و پاسخ به درمان کاربرد دارد.

این دو آزمایش جایگزین کامل یکدیگر نیستند و ممکن است در مراحل مختلف ارزیابی بیمار به‌صورت مکمل استفاده شوند.

کاربردهای بالینی اندازه‌گیری HBV DNA

ارزیابی عفونت مزمن هپاتیت B

اندازه‌گیری HBV DNA یکی از شاخص‌های مورد استفاده برای بررسی فعالیت ویروسی در بیماران مبتلا به هپاتیت B مزمن است.

کمک به تصمیم‌گیری درمانی

مقدار بار ویروسی در کنار ALT، وضعیت فیبروز و سایر عوامل بالینی می‌تواند در ارزیابی نیاز به درمان ضدویروسی نقش داشته باشد.

پایش پاسخ به درمان

اندازه‌گیری متوالی HBV DNA می‌تواند به بررسی میزان سرکوب تکثیر ویروس در طول درمان کمک کند.

بررسی افزایش مجدد بار ویروسی

افزایش HBV DNA در طول پیگیری ممکن است نیازمند بررسی بیشتر از نظر پایبندی به درمان، تغییرات بیماری یا سایر عوامل باشد.

ارزیابی بیماران در معرض خطر فعال‌شدن مجدد HBV

در برخی بیماران تحت درمان‌های سرکوب‌کننده سیستم ایمنی، پایش HBV DNA ممکن است مطابق دستورالعمل‌های بالینی ضرورت داشته باشد.

ملاحظات تفسیر نتایج

نتیجه کمی HBV DNA باید با توجه به محدوده کمی‌سازی معتبر آزمون، شرایط نمونه و وضعیت بالینی بیمار تفسیر شود.

وجود HBV DNA قابل شناسایی لزوماً به معنای نیاز فوری به درمان نیست.

همچنین نتیجه منفی آزمون مولکولی به‌تنهایی برای رد تمام حالات عفونت HBV یا تعیین وضعیت ایمنی فرد کافی نیست.

در پایش طولانی‌مدت بار ویروسی، استفاده از روش‌های استاندارد و توجه به تفاوت عملکرد تحلیلی آزمون‌ها اهمیت دارد.

جمع‌بندی

کیت Truenat® HBV شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time PCR برای شناسایی و اندازه‌گیری DNA ویروس هپاتیت B در نمونه‌های خون، سرم و پلاسمای انسان است.

این آزمون بخشی از ناحیه Core/Pre-core ژنوم ویروس HBV را هدف قرار می‌دهد و با استفاده از فناوری TaqMan انجام می‌شود.

طبق اطلاعات رسمی سازنده، زمان کل آزمون ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای اجرای واکنش نیاز دارد.

حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده 55.92 IU/mL است.

از دیگر ویژگی‌های محصول می‌توان به معرف‌های PCR لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار DNA و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد اشاره کرد.

کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی عرضه می‌شود و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab Uno Dx، Truelab Duo و Truelab Quattro سازگار است.

Truenat HBV می‌تواند در چارچوب کاربرد تأییدشده سازنده، به تشخیص مولکولی عفونت هپاتیت B و اندازه‌گیری بار ویروسی کمک کند.