Truenat® HCV

کیت Truenat HCV مولبایو | تشخیص مولکولی و اندازه‌گیری بار ویروسی هپاتیت C

معرفی کیت Truenat HCV

کیت Truenat® HCV محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون تشخیص مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time PCR است که برای شناسایی و اندازه‌گیری RNA ویروس هپاتیت C در نمونه‌های خون کامل وریدی، سرم و پلاسمای انسان طراحی شده است.

این کیت با هدف قرار دادن ناحیه 3′ UTR ژنوم ویروس هپاتیت C و بهره‌گیری از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan، به تشخیص مولکولی عفونت HCV و پایش بار ویروسی بیماران کمک می‌کند.

ازآنجاکه ویروس هپاتیت C دارای ژنوم RNA است، فرایند شناسایی مولکولی آن شامل مرحله رونویسی معکوس برای تبدیل RNA به DNA مکمل و سپس تکثیر هدف ژنتیکی است.

کیت Truenat HCV بخشی از خانواده محصولات تشخیص مولکولی Truenat بوده و همراه با دستگاه استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های سازگار Truelab مورد استفاده قرار می‌گیرد.

طبق اطلاعات شرکت سازنده، زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای انجام واکنش مولکولی موردنیاز است.

ویروس هپاتیت C چیست؟

ویروس هپاتیت C یا Hepatitis C Virus (HCV) یک ویروس RNAدار از خانواده Flaviviridae است که عمدتاً سلول‌های کبد را آلوده می‌کند.

عفونت HCV می‌تواند به‌صورت حاد یا مزمن بروز کند.

بسیاری از افراد مبتلا در مراحل اولیه بیماری علامت مشخصی ندارند و ممکن است برای مدت طولانی از وجود عفونت آگاه نباشند.

در صورت مزمن شدن عفونت، التهاب مداوم کبد می‌تواند به فیبروز، سیروز و افزایش خطر سرطان سلول‌های کبدی منجر شود.

برخلاف هپاتیت B، برای پیشگیری از هپاتیت C در حال حاضر واکسن تأییدشده‌ای برای استفاده عمومی وجود ندارد؛ بااین‌حال، درمان‌های ضدویروسی مستقیم‌الاثر می‌توانند عفونت را در بیش از ۹۵ درصد بیماران درمان کنند.

راه‌های انتقال ویروس هپاتیت C

ویروس HCV عمدتاً از طریق تماس با خون آلوده منتقل می‌شود.

مهم‌ترین راه‌های انتقال عبارت‌اند از:

استفاده مشترک از سرنگ یا وسایل تزریق

تماس با تجهیزات پزشکی آلوده یا استریل‌نشده

دریافت خون یا فرآورده‌های خونی غربالگری‌نشده

آسیب ناشی از وسایل تیز آلوده به خون

استفاده از ابزار غیراستریل در برخی اقدامات پوستی

انتقال از مادر مبتلا به نوزاد

انتقال جنسی در برخی شرایط همراه با افزایش احتمال تماس خونی

ویروس هپاتیت C از طریق تماس‌های معمول اجتماعی مانند دست دادن، در آغوش گرفتن یا استفاده مشترک از ظروف غذا منتقل نمی‌شود.

علائم بالینی هپاتیت C

بسیاری از افراد مبتلا به هپاتیت C در مراحل اولیه بدون علامت هستند.

در موارد علامت‌دار، ممکن است نشانه‌های زیر مشاهده شوند:

خستگی و ضعف عمومی

کاهش اشتها

تهوع

درد یا ناراحتی شکمی

ادرار تیره

زردی پوست و چشم‌ها

درد مفاصل

نبود علائم به معنای نبود عفونت فعال یا آسیب کبدی نیست.

اهمیت تشخیص مولکولی هپاتیت C

تشخیص آزمایشگاهی هپاتیت C معمولاً با آزمایش آنتی‌بادی ضد HCV آغاز می‌شود.

نتیجه مثبت Anti-HCV نشان‌دهنده مواجهه قبلی یا فعلی با ویروس است، اما به‌تنهایی وجود عفونت فعال را تأیید نمی‌کند.

برای بررسی وجود عفونت فعال، شناسایی RNA ویروس با روش‌های مولکولی اهمیت دارد.

آزمایش HCV RNA PCR چیست؟

آزمایش HCV RNA PCR ماده ژنتیکی ویروس هپاتیت C را مستقیماً شناسایی می‌کند.

در نوع کمی، این آزمایش مقدار RNA ویروس را در نمونه مشخص می‌کند و برای ارزیابی بار ویروسی کاربرد دارد.

بار ویروسی HCV چیست؟

بار ویروسی یا HCV Viral Load بیانگر مقدار RNA ویروس هپاتیت C در حجم مشخصی از نمونه است.

مقدار بار ویروسی معمولاً بر حسب IU/mL گزارش می‌شود.

اندازه‌گیری HCV RNA می‌تواند برای تأیید عفونت فعال، ارزیابی پیش از درمان و بررسی پاسخ ویروسی به درمان استفاده شود.

مقدار بار ویروسی به‌تنهایی شاخص مستقیمی برای تعیین شدت آسیب کبدی نیست.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat HCV

۱. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

برای اجرای واکنش مولکولی تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

این مقدار با حجم نمونه خون اولیه متفاوت است.

۲. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

طبق اطلاعات سازنده، زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است.

۳. شناسایی کمی HCV RNA

نوع آزمون Quantitative Detection است و برای اندازه‌گیری بار ویروسی HCV طراحی شده است.

۴. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

تراشه و اقلام مصرفی اختصاصی آزمون برای استفاده یک‌بارمصرف طراحی شده‌اند.

۵. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

ساختار تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول واکنش طراحی شده است.

۶. معرف‌های مولکولی لیوفیلیزه

معرف‌های واکنش به‌صورت خشک‌شده انجمادی و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۷. پایداری معرف‌ها تا دو سال

طبق اطلاعات سازنده، معرف‌ها در شرایط نگهداری توصیه‌شده تا دو سال پایداری دارند.

۸. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۹. فناوری TaqMan

آزمون از شیمی TaqMan برای شناسایی هدف مولکولی استفاده می‌کند.

۱۰. طراحی اختصاصی پرایمرها

پرایمرها و پروب‌های آزمون برای شناسایی اختصاصی ناحیه هدف ژنوم HCV طراحی شده‌اند.

مشخصات فنی کیت Truenat HCV

نام تجاری محصول

Truenat® HCV

شرکت سازنده

Molbio Diagnostics

عامل بیماری‌زای هدف

Hepatitis C Virus (HCV)

ماده ژنتیکی هدف

HCV RNA

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

استخراج ماده ژنتیکی در پلتفرم Truenat با استفاده از دستگاه Trueprep AUTO v2 و فناوری خودکار مبتنی بر کارتریج انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time PCR Based on TaqMan Chemistry

با توجه به RNAدار بودن ویروس HCV، آزمون شامل مرحله رونویسی معکوس است.

نوع آزمون (Assay Type)

Quantitative Detection – شناسایی کمی

مدت‌زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

حجم محلول استخراج‌شده

۶ میکرولیتر (6 µL)

نمونه‌های بالینی (Clinical Specimen)

خون کامل وریدی انسان (Whole Venous Blood)

پلاسمای انسان (Human Plasma)

سرم انسان (Human Serum)

شرایط نمونه‌گیری، انتقال و نگهداری باید مطابق آخرین دستورالعمل رسمی محصول رعایت شود.

ناحیه ژنتیکی هدف (Gene Target)

3′ Untranslated Region (3′ UTR) of the HCV Genome

ناحیه ترجمه‌نشونده انتهای ۳′ ژنوم ویروس هپاتیت C هدف مولکولی اعلام‌شده برای این کیت است.

این ناحیه بخشی از ژنوم RNA ویروس بوده و در فرایندهای مرتبط با همانندسازی ویروسی نقش دارد.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حساسیت تشخیصی (Sensitivity)

۱۰۰٪

مطابق مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی شرکت سازنده.

ویژگی تشخیصی (Specificity)

۱۰۰٪

مطابق مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی شرکت سازنده.

این مقادیر مربوط به ارزیابی‌های گزارش‌شده توسط سازنده هستند و به معنی تضمین عملکرد صددرصدی در تمام شرایط بالینی نیستند.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

وابسته به ژنوتیپ ویروس و نوع نمونه؛ مطابق دستورالعمل رسمی استفاده (IFU).

شرکت Molbio Diagnostics در صفحه رسمی این محصول مقدار واحدی برای LoD اعلام نکرده و به تفاوت حد تشخیص بر اساس ژنوتیپ و نوع نمونه اشاره کرده است.

بنابراین برای درج مقادیر عددی باید جدول اعتبارسنجی موجود در آخرین نسخه IFU بررسی شود.

حد تشخیص (LoD) با حد کمی‌سازی (LoQ) تفاوت دارد و این دو شاخص نباید به جای یکدیگر استفاده شوند.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

مدت پایداری (Shelf Life)

تا دو سال در شرایط نگهداری توصیه‌شده توسط سازنده.

تاریخ انقضای درج‌شده روی بسته‌بندی ملاک نهایی استفاده است.

محتویات کیت Truenat HCV

طبق اطلاعات رسمی شرکت Molbio Diagnostics، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل اقلام زیر است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® HCV Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی برای اجرای واکنش مولکولی و شناسایی RNA ویروس هپاتیت C.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های لیوفیلیزه

Microtube with Freeze-Dried RT-PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی موردنیاز واکنش.

۳. نوک سمپلر فاقد DNase و RNase

DNase & RNase-Free Pipette Tip

نوک سمپلر برای انتقال محلول استخراج‌شده.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601180005

بسته ۲۰ تستی

تعداد تست: 20T

شماره کاتالوگ: 601180020

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601180025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601180050

موجودی و شرایط سفارش هر بسته باید با اطلاعات تجاری به‌روز شرکت سازنده تطبیق داده شود.

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

بسته پیش‌تیمار عمومی نمونه

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای آماده‌سازی اولیه نمونه پیش از استخراج ماده ژنتیکی.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی در دستگاه Trueprep AUTO v2.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار ماده ژنتیکی مبتنی بر فناوری کارتریجی.

دستگاه‌های PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها برای اجرای آزمون‌های مبتنی بر تراشه Truenat طراحی شده‌اند.

تفاوت Truenat HCV با Truenat HBV

Truenat HCV

برایشناسایی و اندازه‌گیری کمی RNA ویروس هپاتیت C طراحی شده است.

ناحیه هدف آن 3′ UTR ژنوم HCV است و فرایند شناسایی شامل رونویسی معکوس می‌شود.

Truenat HBV

برای شناسایی و اندازه‌گیری کمی DNA ویروس هپاتیت B طراحی شده است.

این آزمون بخشی از ناحیه Core/Pre-core ژنوم HBV را هدف قرار می‌دهد و به مرحله رونویسی معکوس نیاز ندارد.

هر دو آزمون برای پایش مولکولی عفونت‌های ویروسی کبد کاربرد دارند، اما اهداف ژنتیکی و کاربردهای اختصاصی آن‌ها متفاوت است.

کاربردهای بالینی اندازه‌گیری HCV RNA

تأیید عفونت فعال هپاتیت C

شناسایی RNA ویروس می‌تواند وجود عفونت فعال را در فرد دارای آزمایش Anti-HCV مثبت تأیید کند.

ارزیابی پیش از شروع درمان

اندازه‌گیری بار ویروسی می‌تواند بخشی از ارزیابی اولیه بیمار پیش از درمان ضدویروسی باشد.

پایش پاسخ به درمان

بررسی HCV RNA در زمان‌های تعیین‌شده توسط دستورالعمل‌های درمانی به ارزیابی پاسخ ویروسی کمک می‌کند.

ارزیابی پاسخ ویروسی پایدار (SVR)

عدم شناسایی HCV RNA در زمان تعیین‌شده پس از پایان درمان، معمولاً ۱۲ هفته، برای ارزیابی پاسخ ویروسی پایدار (SVR12) استفاده می‌شود.

بررسی احتمال عفونت مجدد

در افراد دارای سابقه درمان موفق که همچنان در معرض خطر هستند، آزمایش HCV RNA می‌تواند برای بررسی عفونت مجدد کاربرد داشته باشد.

ملاحظات تفسیر نتایج

نتیجه آزمایش HCV RNA باید با توجه به وضعیت بالینی بیمار، زمان نمونه‌گیری و محدوده عملکرد معتبر آزمون تفسیر شود.

نتیجه منفی به‌تنهایی عفونت بسیار اخیر را در تمام شرایط رد نمی‌کند.

همچنین در گزارش کمی، تفاوت میان «RNA شناسایی نشد»، «RNA شناسایی شد ولی کمتر از حد کمی‌سازی است» و «مقدار کمی قابل گزارش» اهمیت دارد.

برای پایش طولانی‌مدت، استفاده از روش‌های معتبر و توجه به تفاوت‌های تحلیلی بین آزمون‌ها ضروری است.

جمع‌بندی

کیت Truenat® HCV محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time PCR برای شناسایی و اندازه‌گیری RNA ویروس هپاتیت C در نمونه‌های خون کامل وریدی، سرم و پلاسمای انسان است.

این آزمون ناحیه 3′ UTR ژنوم ویروس HCV را هدف قرار می‌دهد و از فناوری TaqMan استفاده می‌کند.

بر اساس اطلاعات رسمی سازنده، مدت‌زمان کل آزمون ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای اجرای واکنش موردنیاز است.

حد تشخیص این کیت به ژنوتیپ ویروس و نوع نمونه وابسته بوده و باید بر اساس آخرین نسخه IFU گزارش شود.

معرف‌های لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار ماده ژنتیکی و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از ویژگی‌های مهم محصول هستند.

کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی معرفی شده و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab Uno Dx، Truelab Duo و Truelab Quattro سازگار است.

Truenat HCV می‌تواند در چارچوب کاربرد تأییدشده سازنده به تشخیص مولکولی عفونت هپاتیت C و پایش بار ویروسی بیماران کمک کند.