Truenat® HEV

کیت Truenat HEV مولبایو | تشخیص مولکولی ویروس هپاتیت E در خون و مدفوع

معرفی کیت Truenat HEV

کیت Truenat® HEV محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون تشخیص مولکولی مبتنی بر تراشه (Chip-Based Real-Time RT-PCR) است که برای شناسایی RNA ویروس هپاتیت E یا Hepatitis E Virus در نمونه‌های انسانی طراحی شده است.

این محصول برای تشخیص کمی ویروس HEV در خون کامل، سرم و پلاسما و تشخیص کیفی ویروس در نمونه مدفوع کاربرد دارد.

آزمون با هدف قرار دادن ژن ORF1 Polyprotein در ژنوم ویروس هپاتیت E و استفاده از فناوری Real-Time RT-PCR مبتنی بر شیمی TaqMan، به تشخیص آزمایشگاهی عفونت HEV کمک می‌کند.

بر اساس اطلاعات شرکت سازنده، زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است و برای اجرای واکنش مولکولی تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

کیت Truenat HEV بخشی از خانواده آزمون‌های تشخیص مولکولی Truenat بوده و همراه با دستگاه استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های سازگار Truelab استفاده می‌شود.

ویروس هپاتیت E چیست؟

ویروس هپاتیت E یا Hepatitis E Virus (HEV) یک ویروس RNAدار است که می‌تواند باعث التهاب حاد کبد شود.

این ویروس از خانواده Hepeviridae بوده و عفونت آن در بسیاری از موارد به‌صورت خودمحدودشونده بهبود پیدا می‌کند.

بااین‌حال، هپاتیت E در برخی گروه‌های بیماران ممکن است عوارض جدی ایجاد کند.

بیماری شدید به‌ویژه در زنان باردار و افراد دارای بیماری زمینه‌ای کبد اهمیت دارد. همچنین در بعضی بیماران دارای نقص ایمنی، عفونت HEV می‌تواند به شکل مزمن ادامه پیدا کند.

راه‌های انتقال ویروس هپاتیت E

مسیر انتقال ویروس HEV به ژنوتیپ ویروس و شرایط اپیدمیولوژیک بستگی دارد.

مهم‌ترین راه‌های انتقال عبارت‌اند از:

مصرف آب آشامیدنی آلوده

انتقال مدفوعی ـ دهانی

مصرف گوشت خام یا نیم‌پز آلوده، به‌ویژه در برخی عفونت‌های مشترک انسان و حیوان

تماس با منابع غذایی آلوده

انتقال از طریق فرآورده‌های خونی آلوده در برخی شرایط

انتقال مادر به جنین در موارد خاص

در مناطقی که دسترسی به آب سالم و سیستم بهداشتی مناسب محدود است، شیوع هپاتیت E می‌تواند با آلودگی منابع آب ارتباط داشته باشد.

علائم بالینی هپاتیت E

بسیاری از افراد مبتلا به HEV ممکن است علائم خفیف یا غیراختصاصی داشته باشند.

علائم احتمالی شامل موارد زیر است:

تب

خستگی و ضعف عمومی

کاهش اشتها

تهوع و استفراغ

درد شکمی

ادرار تیره

مدفوع کم‌رنگ

زردی پوست و چشم‌ها

افزایش آنزیم‌های کبدی

شدت علائم می‌تواند با توجه به وضعیت ایمنی، بیماری‌های زمینه‌ای و شرایط بیمار متفاوت باشد.

اهمیت هپاتیت E در زنان باردار

هپاتیت E در دوران بارداری، به‌ویژه در سه‌ماهه سوم، می‌تواند با خطر بالاتر بیماری شدید همراه باشد.

این موضوع در عفونت‌های ناشی از برخی ژنوتیپ‌های ویروس، به‌خصوص ژنوتیپ ۱، اهمیت بیشتری دارد.

در موارد شدید، احتمال بروز نارسایی حاد کبد و عوارض مادری و جنینی افزایش پیدا می‌کند.

به همین دلیل، بررسی سریع و مناسب علل هپاتیت حاد در زنان باردار اهمیت ویژه‌ای دارد.

اهمیت هپاتیت E در بیماران دارای نقص ایمنی

اگرچه بیشتر عفونت‌های HEV خودمحدودشونده هستند، در برخی افراد دارای نقص ایمنی ممکن است عفونت پایدار ایجاد شود.

این وضعیت به‌ویژه در برخی بیماران پیوند عضو و افراد دریافت‌کننده درمان‌های سرکوب‌کننده سیستم ایمنی مطرح است.

در چنین شرایطی، شناسایی RNA ویروس و بررسی تداوم حضور آن می‌تواند در ارزیابی بالینی بیمار اهمیت داشته باشد.

اهمیت تشخیص مولکولی هپاتیت E

تشخیص آزمایشگاهی هپاتیت E ممکن است با استفاده از آزمایش‌های سرولوژیک و مولکولی انجام شود.

آزمایش‌های آنتی‌بادی مانند Anti-HEV IgM می‌توانند در ارزیابی عفونت اخیر نقش داشته باشند.

در مقابل، روش‌های مولکولی مانند Real-Time RT-PCR با شناسایی مستقیم RNA ویروس به بررسی وجود ماده ژنتیکی HEV در نمونه کمک می‌کنند.

این روش‌ها به‌ویژه در بیماران دارای نقص ایمنی، موارد مشکوک با نتایج سرولوژیک نامشخص و بررسی عفونت پایدار اهمیت دارند.

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat HEV

۱. تشخیص کمی در خون، سرم و پلاسما

کیت Truenat HEV برای شناسایی کمی RNA ویروس در نمونه‌های خون کامل، سرم و پلاسما طراحی شده است.

۲. تشخیص کیفی در نمونه مدفوع

در نمونه مدفوع، آزمون برای شناسایی کیفی ویروس HEV استفاده می‌شود.

نتیجه مدفوع نباید به‌عنوان اندازه‌گیری کمی بار ویروسی معرفی شود.

۳. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

برای اجرای واکنش RT-PCR تنها ۶ میکرولیتر (6 µL) از محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

این حجم با مقدار نمونه بالینی اولیه متفاوت است.

۴. نتیجه آزمایش در ۶۰ دقیقه

طبق اطلاعات سازنده، مدت‌زمان کل آزمون از نمونه تا نتیجه ۶۰ دقیقه است.

۵. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

تراشه و اقلام مصرفی اختصاصی برای استفاده یک‌بارمصرف طراحی شده‌اند.

۶. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

ساختار تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در طول واکنش طراحی شده است.

۷. معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

معرف‌های مولکولی به‌صورت خشک‌شده انجمادی و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۸. پایداری معرف‌ها تا دو سال

طبق اطلاعات سازنده، معرف‌ها در شرایط نگهداری توصیه‌شده تا دو سال پایداری دارند.

۹. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۱۰. فناوری TaqMan

آزمون از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan برای شناسایی RNA ویروس استفاده می‌کند.

مشخصات فنی کیت Truenat HEV

نام تجاری محصول

Truenat® HEV

شرکت سازنده

Molbio Diagnostics

عامل بیماری‌زای هدف

Hepatitis E Virus (HEV)

ماده ژنتیکی هدف

HEV RNA

روش استخراج ماده ژنتیکی (Extraction Method)

Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction in Trueprep AUTO v2

استخراج خودکار ماده ژنتیکی با استفاده از فناوری میکروفلوئیدیک مبتنی بر کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time RT-PCR Based on TaqMan Chemistry

به دلیل RNAدار بودن ویروس هپاتیت E، فرایند شناسایی شامل رونویسی معکوس RNA و سپس تکثیر هدف مولکولی است.

نوع آزمون (Assay Type)

Quantitative Detection: برای خون کامل، سرم و پلاسما.

Qualitative Detection: برای مدفوع.

مدت‌زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۶۰ دقیقه (60 Minutes)

حجم محلول استخراج‌شده

۶ میکرولیتر (6 µL)

نمونه‌های بالینی (Clinical Specimen)

خون کامل انسان (Whole Blood)

سرم انسان (Human Serum)

پلاسمای انسان (Human Plasma)

مدفوع انسان (Stool)

شرایط نمونه‌گیری، انتقال، پیش‌تیمار و نگهداری هر نوع نمونه باید مطابق آخرین دستورالعمل رسمی محصول رعایت شود.

ژن هدف (Gene Target)

ORF1 Polyprotein Gene of HEV Genome

ژن ORF1 بخشی از ژنوم ویروس هپاتیت E است که پروتئین‌های غیرساختاری مرتبط با همانندسازی RNA ویروس را کد می‌کند.

این ناحیه به‌عنوان هدف مولکولی کیت Truenat HEV معرفی شده است.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

516 copies/mL

این مقدار حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده توسط شرکت Molbio Diagnostics است.

صفحه رسمی محصول، نوع نمونه متناظر با این عدد را به‌صورت مستقل مشخص نکرده است؛ بنابراین نباید آن را بدون مراجعه به IFU به تمام انواع نمونه تعمیم داد.

همچنین حد تشخیص (LoD) با حد کمی‌سازی (LoQ) تفاوت دارد.

حساسیت تشخیصی (Sensitivity)

۱۰۰٪

مطابق مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی شرکت سازنده.

ویژگی تشخیصی (Specificity)

۱۰۰٪

مطابق مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی شرکت سازنده.

این مقادیر مربوط به ارزیابی‌های گزارش‌شده توسط سازنده هستند و تضمین‌کننده عملکرد صددرصدی در تمام جمعیت‌ها و شرایط بالینی نیستند.

دمای نگهداری کیت (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد (2–30°C)

مدت پایداری (Shelf Life)

تا دو سال در شرایط نگهداری توصیه‌شده.

تاریخ انقضای درج‌شده روی بسته‌بندی ملاک نهایی استفاده از محصول است.

محتویات کیت Truenat HEV

بر اساس اطلاعات رسمی شرکت Molbio Diagnostics، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل اقلام زیر است.

۱. تراشه میکرو PCR اختصاصی

Truenat® HEV Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی برای اجرای واکنش مولکولی و شناسایی RNA ویروس هپاتیت E.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه

Microtube with Freeze-Dried RT-PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی موردنیاز واکنش.

۳. نوک سمپلر فیلتردار فاقد DNase و RNase

DNase- and RNase-Free Filter Barrier Microtip

نوک سمپلر فیلتردار برای انتقال محلول استخراج‌شده و کاهش خطر انتقال آلودگی.

۴. بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

برای کمک به حفظ شرایط مناسب نگهداری محتویات بسته.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

بسته ۵ تستی

تعداد تست: 5T

شماره کاتالوگ: 601330005

بسته ۲۰ تستی

تعداد تست: 20T

شماره کاتالوگ: 601330020

بسته ۲۵ تستی

تعداد تست: 25T

شماره کاتالوگ: 601330025

بسته ۵۰ تستی

تعداد تست: 50T

شماره کاتالوگ: 601330050

موجودی و شرایط عرضه هر بسته باید هنگام ثبت سفارش با اطلاعات تجاری به‌روز شرکت سازنده تطبیق داده شود.

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

بسته پیش‌تیمار عمومی نمونه

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای آماده‌سازی اولیه نمونه پیش از استخراج ماده ژنتیکی.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجیTrueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی در دستگاه Trueprep AUTO v2.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار ماده ژنتیکی مبتنی بر فناوری میکروفلوئیدیک و کارتریج.

دستگاه‌های PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

این دستگاه‌ها برای اجرای آزمون‌های مولکولی مبتنی بر تراشه Truenat طراحی شده‌اند.

تفاوت Truenat HEV با Truenat HAV، HBV و HCV

Truenat HEV

برای شناسایی RNA ویروس هپاتیت E طراحی شده است.

در خون، سرم و پلاسما تشخیص کمی و در مدفوع تشخیص کیفی انجام می‌دهد.

ژن هدف آن ORF1 است.

Truenat HAV

برای شناسایی RNA ویروس هپاتیت A طراحی شده است.

در خون، سرم و پلاسما تشخیص کمی و در مدفوع تشخیص کیفی انجام می‌دهد.

ناحیه هدف آن 5′ NCR است.

Truenat HBV

برای شناسایی و اندازه‌گیری DNA ویروس هپاتیت B طراحی شده است.

ناحیه هدف آن Core/Pre-core ژنوم HBV است.

Truenat HCV

برای شناسایی و اندازه‌گیری RNA ویروس هپاتیت C طراحی شده است.

ناحیه هدف آن 3′ UTR ژنوم HCV است.

هر چهار کیت در گروه تشخیص مولکولی هپاتیت قرار دارند، اما عامل بیماری‌زا، نوع ماده ژنتیکی هدف، نمونه‌های قابل استفاده و کاربرد تشخیصی آن‌ها متفاوت است.

کاربردهای آزمایشگاهی Truenat HEV

کمک به تشخیص عفونت حاد هپاتیت E

شناسایی RNA ویروس می‌تواند در شرایط مناسب به تکمیل بررسی آزمایشگاهی بیماران مشکوک به هپاتیت E کمک کند.

بررسی بیماران دارای نقص ایمنی

آزمایش مولکولی HEV در برخی بیماران دارای نقص ایمنی، به‌ویژه هنگام بررسی عفونت پایدار، اهمیت دارد.

بررسی بیماران مبتلا به هپاتیت با علت نامشخص

در بیماران دارای افزایش آنزیم‌های کبدی یا علائم هپاتیت، بررسی HEV ممکن است بر اساس ارزیابی بالینی ضروری باشد.

بررسی نمونه مدفوع

امکان تشخیص کیفی HEV در نمونه مدفوع می‌تواند در برخی بررسی‌های آزمایشگاهی و اپیدمیولوژیک مفید باشد.

کمک به بررسی شیوع بیماری

شناسایی مولکولی ویروس در نمونه‌های مناسب می‌تواند در بررسی موارد مرتبط با شیوع هپاتیت E نقش داشته باشد.

ملاحظات تفسیر نتایج

نتیجه آزمون باید همراه با علائم بالینی، زمان شروع بیماری، سابقه تماس، وضعیت ایمنی بیمار و سایر یافته‌های آزمایشگاهی تفسیر شود.

نتیجه منفی مولکولی به‌تنهایی عفونت HEV را در تمام مراحل بیماری رد نمی‌کند.

همچنین نتیجه کمی خون، سرم یا پلاسما نباید مستقیماً با نتیجه کیفی مدفوع مقایسه شود.

در بیماران دارای نقص ایمنی، بررسی تداوم RNA ویروس ممکن است بر اساس دستورالعمل‌های بالینی ضرورت داشته باشد.

جمع‌بندی

کیت Truenat® HEV محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time RT-PCR برای شناسایی RNA ویروس هپاتیت E است.

این کیت امکان تشخیص کمی در نمونه‌های خون کامل، سرم و پلاسما و تشخیص کیفی در نمونه مدفوع را فراهم می‌کند.

آزمون ژن ORF1 Polyprotein ژنوم HEV را هدف قرار می‌دهد و از فناوری TaqMan استفاده می‌کند.

بر اساس مشخصات رسمی سازنده، زمان کل آزمون ۶۰ دقیقه است و تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده برای اجرای واکنش موردنیاز است.

حد تشخیص تحلیلی اعلام‌شده 516 copies/mL است.

معرف‌های RT-PCR لیوفیلیزه، تراشه هوشمند، استخراج خودکار ماده ژنتیکی و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از ویژگی‌های مهم محصول هستند.

کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی عرضه می‌شود و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab Uno Dx، Truelab Duo و Truelab Quattro سازگار است.

Truenat HEV می‌تواند در چارچوب کاربرد تأییدشده سازنده به تشخیص مولکولی عفونت هپاتیت E و بررسی نمونه‌های بالینی کمک کند.