Truenat® HSV 1/2

کیت Truenat HSV 1/2 مولبایو | تشخیص مولکولی ویروس هرپس سیمپلکس نوع ۱ و ۲

معرفی کیت Truenat HSV 1/2

کیت Truenat® HSV 1/2 محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی نیمه‌کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time PCR است که برای شناسایی ویروس هرپس سیمپلکس نوع ۱ و ۲ (Herpes Simplex Virus 1 and 2) طراحی شده است.

این کیت DNA ویروس هرپس سیمپلکس را در نمونه‌های سواب تناسلی و مایع مغزی‌نخاعی (CSF) شناسایی می‌کند و می‌تواند در تشخیص آزمایشگاهی عفونت HSV کمک‌کننده باشد.

آزمون از ژن DNA Polymerase یا UL30 به‌عنوان هدف مولکولی استفاده می‌کند و با تجهیزات استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های تشخیص مولکولی خانواده Truelab سازگار است.

از ویژگی‌های این محصول می‌توان به زمان پاسخ‌دهی حدود ۶۰ دقیقه، نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده، معرف‌های لیوفیلیزه و نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد اشاره کرد.

ویروس هرپس سیمپلکس (HSV) چیست؟

ویروس هرپس سیمپلکس از خانواده Herpesviridae است و دو نوع اصلی دارد:

HSV-1: بیشتر با تبخال دهانی و عفونت‌های ناحیه دهان ارتباط دارد، اما می‌تواند عامل تبخال تناسلی نیز باشد.

HSV-2: بیشتر با عفونت‌های تناسلی مرتبط است و معمولاً از طریق تماس جنسی انتقال پیدا می‌کند.

هر دو نوع ویروس پس از عفونت اولیه می‌توانند به‌صورت نهفته در سلول‌های عصبی باقی بمانند و در زمان‌های مختلف دوباره فعال شوند.

بسیاری از افراد مبتلا ممکن است علائم خفیف داشته باشند یا بدون علامت باشند.

علائم عفونت HSV

تظاهرات عفونت هرپس سیمپلکس به نوع ویروس، محل عفونت و وضعیت ایمنی فرد بستگی دارد.

علائم احتمالی عبارت‌اند از:

تاول‌های دردناک در ناحیه دهان یا اندام تناسلی

زخم‌های پوستی یا مخاطی

احساس سوزش، خارش یا گزگز پیش از بروز ضایعات

درد هنگام ادرار

تب و احساس ناخوشی عمومی در برخی موارد عفونت اولیه

عود دوره‌ای ضایعات

در موارد نادر اما مهم، HSV می‌تواند باعث عفونت دستگاه عصبی مرکزی از جمله مننژیت یا انسفالیت شود.

اهمیت تشخیص مولکولی HSV-1 و HSV-2

تشخیص عفونت هرپس تنها بر اساس ظاهر ضایعات همیشه قابل‌اعتماد نیست؛ زیرا بیماری‌های مختلف ممکن است علائم مشابه ایجاد کنند.

روش‌های مولکولی مانند PCR با شناسایی مستقیم DNA ویروس می‌توانند به تشخیص عفونت کمک کنند.

در بیماران دارای ضایعات تناسلی، آزمایش مولکولی نمونه مناسب می‌تواند برای تأیید عفونت مفید باشد.

در بیماران مشکوک به عفونت سیستم عصبی مرکزی، بررسی CSF از نظر DNA ویروس HSV اهمیت بالینی ویژه‌ای دارد.

البته تصمیم‌گیری درباره درمان موارد مشکوک به انسفالیت نباید تا آماده‌شدن نتیجه آزمایش به تأخیر بیفتد.

روش عملکرد کیت Truenat HSV 1/2

کیت Truenat HSV 1/2 از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر تراشه استفاده می‌کند.

مرحله اول: جمع‌آوری نمونه

نمونه بالینی مناسب بر اساس وضعیت بیمار و دستورالعمل آزمایش جمع‌آوری می‌شود.

نمونه‌های معرفی‌شده توسط سازنده شامل سواب تناسلی و مایع مغزی‌نخاعی هستند.

مرحله دوم: استخراج DNA

DNA ویروس با استفاده از دستگاه Trueprep AUTO v2 و کارتریج‌های استخراج سازگار آماده‌سازی می‌شود.

مرحله سوم: آماده‌سازی واکنش

۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده به میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده PCR اضافه می‌شود.

مرحله چهارم: اجرای Real-Time PCR

محلول واکنش به تراشه اختصاصی Truenat HSV 1/2 منتقل شده و در دستگاه سازگار Truelab آزمایش می‌شود.

مرحله پنجم: بررسی نتیجه

نتیجه بر اساس سیگنال‌های حاصل از تکثیر هدف مولکولی و وضعیت کنترل داخلی تفسیر می‌شود.

ژن هدف UL30

ژن UL30 کدکننده DNA پلیمراز ویروس هرپس سیمپلکس است.

این آنزیم نقش مهمی در تکثیر ژنوم ویروس دارد.

کیت Truenat HSV 1/2 ناحیه‌ای از ژن DNA Polymerase در ژنوم HSV-1 و HSV-2 را هدف قرار می‌دهد.

توجه داشته باشید که پوشش هر دو نوع ویروس لزوماً به معنای گزارش جداگانه HSV-1 و HSV-2 نیست. نحوه گزارش تفکیکی انواع باید مطابق آخرین دستورالعمل استفاده از کیت بررسی شود.

مشخصات فنی کیت Truenat HSV 1/2

نام تجاری: Truenat® HSV 1/2

شرکت سازنده: Molbio Diagnostics

عامل هدف: Herpes Simplex Virus Type 1 and Type 2

نوع ماده ژنتیکی: DNA

روش تشخیص: Chip-Based Real-Time PCR

نوع آزمون: نیمه‌کمی (Semi-Quantitative)

ژن هدف: DNA Polymerase Gene (UL30)

نمونه بالینی: سواب تناسلی و مایع مغزی‌نخاعی (CSF)

زمان کل آزمون: حدود ۶۰ دقیقه

حجم محلول استخراج‌شده: ۶ میکرولیتر

کنترل داخلی: Internal Process Control – Extraction Control

حد تشخیص (LoD): 294 copies/mL

حساسیت اعلام‌شده سازنده: 100%

ویژگی اعلام‌شده سازنده: 100%

دمای نگهداری: ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

نوع معرف: Freeze-Dried PCR Reagents

حد تشخیص کیت Truenat HSV 1/2

حد تشخیص یا Limit of Detection یکی از شاخص‌های عملکرد تحلیلی آزمایش‌های مولکولی است.

شرکت Molbio Diagnostics برای کیت Truenat HSV 1/2 مقدار زیر را اعلام کرده است:

LoD = 294 copies/mL

این مقدار نشان‌دهنده حد تشخیص گزارش‌شده در شرایط اعتبارسنجی سازنده است.

حد تشخیص نباید با حد کمی‌سازی یا دامنه اندازه‌گیری کمی یکسان در نظر گرفته شود.

همچنین نتیجه منفی در نمونه‌ای که مقدار DNA ویروس کمتر از حد تشخیص باشد، نمی‌تواند عفونت را با قطعیت رد کند.

حساسیت و ویژگی آزمون

سازنده برای این محصول حساسیت و ویژگی ۱۰۰ درصد را اعلام کرده است.

این مقادیر باید در چارچوب مطالعه اعتبارسنجی محصول تفسیر شوند و به معنای عملکرد صددرصدی در تمام جمعیت‌ها، انواع نمونه‌ها و شرایط بالینی نیستند.

عوامل پیش‌تحلیلی مانند کیفیت نمونه، زمان نمونه‌گیری و شرایط نگهداری می‌توانند بر نتیجه تأثیر بگذارند.

ویژگی‌های اصلی کیت Truenat HSV 1/2

۱. شناسایی مولکولی HSV-1 و HSV-2

آزمون برای شناسایی DNA هر دو نوع اصلی ویروس هرپس سیمپلکس طراحی شده است.

۲. فناوری Real-Time PCR

استفاده از روش تکثیر مولکولی مبتنی بر تراشه.

۳. نتیجه در حدود ۶۰ دقیقه

زمان کل آزمون طبق اطلاعات منتشرشده توسط سازنده حدود یک ساعت است.

۴. نیاز به ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

حجم کم محلول موردنیاز برای آماده‌سازی واکنش PCR.

۵. قابلیت بررسی نمونه CSF

امکان استفاده در بررسی مولکولی نمونه مایع مغزی‌نخاعی مطابق کاربرد تعریف‌شده محصول.

۶. سازگاری با سواب تناسلی

استفاده از نمونه‌های سواب تناسلی برای کمک به تشخیص عفونت HSV.

۷. معرف‌های لیوفیلیزه

معرف‌های PCR به‌صورت خشک‌شده انجمادی ارائه می‌شوند.

۸. تراشه یک‌بارمصرف

استفاده از تراشه اختصاصی برای هر آزمایش.

۹. استخراج خودکار اسید نوکلئیک

سازگاری با دستگاه Trueprep AUTO v2.

۱۰. نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

امکان نگهداری محصول در محدوده دمایی تعیین‌شده توسط سازنده.

محتویات کیت Truenat HSV 1/2

هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل اقلام زیر است:

۱. تراشه اختصاصی PCR

Truenat HSV 1/2 Micro-PCR Chip

۲. میکروتیوب معرف

Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents

۳. نوک سمپلر

DNase/RNase-Free Pipette Tip

۴. رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

وجود رطوبت‌گیر در گواهی آنالیز رسمی سازنده نیز ذکر شده است.

مواد مصرفی موردنیاز

برای اجرای آزمون، علاوه بر کیت اصلی، مواد مصرفی مکمل زیر معرفی شده‌اند:

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

Trueprep AUTO Transport Medium for Swab Specimen

استفاده از محیط انتقال سواب باید متناسب با نوع نمونه و دستورالعمل رسمی محصول انجام شود.

دستگاه‌های سازگار

Trueprep AUTO v2

برای استخراج خودکار DNA و آماده‌سازی محلول موردنیاز آزمایش.

Truelab Uno Dx

دستگاه اجرای آزمون Real-Time PCR مبتنی بر تراشه.

Truelab Duo

سیستم تشخیص مولکولی دارای دو جایگاه آزمایش.

Truelab Quattro

سیستم سازگار خانواده Truelab دارای چهار جایگاه آزمایش.

بسته‌بندی و شماره کاتالوگ

کیت Truenat HSV 1/2 در ظرفیت‌های زیر معرفی شده است:

بسته ۵ تستی: 601570005

بسته ۲۰ تستی: 601570020

بسته ۲۵ تستی: 601570025

بسته ۵۰ تستی: 601570050

انتخاب ظرفیت مناسب به تعداد آزمایش‌های موردنیاز و برنامه کاری آزمایشگاه بستگی دارد.

کاربردهای بالینی کیت

تشخیص عفونت هرپس تناسلی

این آزمون می‌تواند در شناسایی DNA ویروس HSV در نمونه سواب تناسلی کمک‌کننده باشد.

بررسی عفونت سیستم عصبی مرکزی

شناسایی HSV DNA در CSF یکی از روش‌های مهم در بررسی بیماران مشکوک به عفونت هرپسی دستگاه عصبی مرکزی است.

کمک به تشخیص افتراقی

در بیمارانی که علائم بالینی مشابه سایر عفونت‌ها دارند، شناسایی مولکولی HSV می‌تواند اطلاعات تشخیصی تکمیلی فراهم کند.

پشتیبانی از آزمایشگاه‌های مولکولی

تجهیزات کم‌حجم پلتفرم Truenat امکان اجرای آزمایش را در مراکز مجهز به دستگاه‌های سازگار فراهم می‌کند.

تفاوت HSV-1 و HSV-2

هر دو نوع ویروس می‌توانند عفونت دهانی یا تناسلی ایجاد کنند.

بااین‌حال، HSV-1 بیشتر با تبخال دهانی و HSV-2 بیشتر با تبخال تناسلی ارتباط دارد.

نوع ویروس می‌تواند در پیش‌بینی الگوی عود و مشاوره بالینی اهمیت داشته باشد.

ازاین‌رو، در شرایطی که افتراق قطعی دو نوع ویروس موردنیاز باشد، باید اطمینان حاصل شود آزمون انتخاب‌شده قابلیت گزارش تفکیکی معتبر دارد.

تفاوت PCR با آزمایش آنتی‌بادی HSV

آزمایش PCR برای شناسایی مستقیم DNA ویروس در نمونه مناسب انجام می‌شود.

در مقابل، آزمایش‌های سرولوژیک پاسخ آنتی‌بادی بدن نسبت به HSV را بررسی می‌کنند.

وجود آنتی‌بادی ممکن است نشان‌دهنده مواجهه قبلی باشد و الزاماً محل عفونت یا فعال‌بودن آن را مشخص نمی‌کند.

انتخاب روش مناسب به هدف آزمایش و شرایط بالینی بیمار بستگی دارد.

نکات مهم در تفسیر نتایج

نتیجه مثبت نشان‌دهنده شناسایی هدف مولکولی HSV در نمونه بررسی‌شده است.

نتیجه منفی لزوماً تمام موارد عفونت HSV را رد نمی‌کند.

در ضایعات پوستی و مخاطی، زمان نمونه‌گیری و کیفیت نمونه بر احتمال شناسایی ویروس تأثیر دارند.

در موارد مشکوک به انسفالیت HSV، نتیجه منفی اولیه CSF ممکن است در برخی شرایط نیازمند بررسی مجدد باشد.

همچنین شناسایی DNA ویروس به‌تنهایی شدت بیماری یا ضرورت یک درمان مشخص را تعیین نمی‌کند.

تفسیر نهایی باید توسط پزشک و همراه با علائم، سابقه بیمار و سایر یافته‌های تشخیصی انجام شود.

جمع‌بندی

کیت Truenat HSV 1/2 شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی نیمه‌کمی برای شناسایی DNA ویروس هرپس سیمپلکس نوع ۱ و ۲ در نمونه‌های سواب تناسلی و مایع مغزی‌نخاعی است.

این محصول از فناوری Chip-Based Real-Time PCR استفاده می‌کند و ژن DNA Polymerase (UL30) را هدف قرار می‌دهد.

زمان کل آزمون حدود ۶۰ دقیقه، حجم محلول استخراج‌شده موردنیاز ۶ میکرولیتر و حد تشخیص اعلام‌شده ۲۹۴ کپی در میلی‌لیتر است.

سازگاری با دستگاه Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab Uno Dx، Duo و Quattro، معرف‌های لیوفیلیزه و امکان نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از ویژگی‌های اصلی آن هستند.

این کیت می‌تواند به‌عنوان بخشی از فرایند تشخیص مولکولی عفونت HSV در آزمایشگاه‌های مجهز مورد استفاده قرار گیرد.