Truenat® CT/NG

کیت Truenat CT/NG مولبایو | تشخیص مولکولی کلامیدیا و سوزاک با Real-Time PCR

معرفی کیت Truenat CT/NG

کیت Truenat® CT/NG محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time Duplex PCR است که برای شناسایی نیمه‌کمی دو عامل باکتریایی مهم عفونت‌های منتقله از راه جنسی طراحی شده است:

Chlamydia trachomatis یا کلامیدیا تراکوماتیس (CT)

Neisseria gonorrhoeae یا نایسریا گونوره‌آ (NG)، عامل بیماری سوزاک

این کیت امکان شناسایی هم‌زمان DNA دو باکتری را در نمونه‌های بالینی مشخص‌شده توسط سازنده فراهم می‌کند و به تشخیص عفونت‌های علامت‌دار و بدون علامت کمک می‌کند.

آزمون با فناوری Real-Time PCR و شیمی TaqMan انجام می‌شود و برای استخراج اسید نوکلئیک از دستگاه Trueprep AUTO v2 و برای تکثیر و شناسایی مولکولی از تجهیزات خانواده Truelab استفاده می‌کند.

زمان کل آزمون حدود ۶۰ دقیقه است و برای اجرای واکنش تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده موردنیاز است.

کلامیدیا تراکوماتیس چیست؟

Chlamydia trachomatis یک باکتری داخل‌سلولی اجباری است که از عوامل شایع عفونت‌های منتقله از راه جنسی محسوب می‌شود.

عفونت کلامیدیا می‌تواند دستگاه تناسلی زنان و مردان را درگیر کند و در بسیاری از موارد بدون علامت باشد.

در زنان، عفونت درمان‌نشده ممکن است به دهانه رحم و دستگاه تناسلی فوقانی گسترش یابد و باعث بیماری التهابی لگن شود.

در مردان، کلامیدیا می‌تواند با التهاب مجرای ادرار و در برخی موارد التهاب اپیدیدیم همراه باشد.

تشخیص و درمان به‌موقع برای کاهش احتمال عوارض و جلوگیری از انتقال عفونت اهمیت دارد.

نایسریا گونوره‌آ چیست؟

Neisseria gonorrhoeae یک باکتری گرم‌منفی دیپلوکوک است که عامل بیماری سوزاک محسوب می‌شود.

این باکتری می‌تواند مخاط دستگاه تناسلی، راست‌روده، حلق و در برخی موارد چشم را آلوده کند.

عفونت سوزاک ممکن است با ترشحات غیرطبیعی، سوزش ادرار یا التهاب دستگاه تناسلی همراه باشد؛ اما برخی افراد هیچ علامتی ندارند.

سوزاک درمان‌نشده می‌تواند به عوارضی مانند بیماری التهابی لگن، اپیدیدیمیت و به‌ندرت عفونت منتشر گونوکوکی منجر شود.

مقاومت آنتی‌بیوتیکی نایسریا گونوره‌آ نیز یکی از چالش‌های مهم بهداشت عمومی است.

چرا تشخیص هم‌زمان کلامیدیا و سوزاک اهمیت دارد؟

کلامیدیا و سوزاک می‌توانند علائم مشابهی ایجاد کنند و عفونت هم‌زمان با هر دو عامل نیز امکان‌پذیر است.

از سوی دیگر، نبود علائم بالینی به معنای نبود عفونت نیست.

استفاده از یک آزمون مولکولی دوگانه می‌تواند شناسایی این دو عامل را در یک فرایند آزمایشگاهی امکان‌پذیر کند.

این قابلیت به‌ویژه در بررسی بیماران مبتلا به اورتریت، سرویسیت و افراد دارای عوامل خطر عفونت‌های منتقله از راه جنسی اهمیت دارد.

علائم عفونت کلامیدیا و سوزاک

علائم احتمالی در زنان

ترشحات غیرطبیعی واژن

سوزش هنگام ادرار

خون‌ریزی بین دوره‌های قاعدگی یا پس از رابطه جنسی

درد زیر شکم یا لگن

درد هنگام رابطه جنسی

علائم احتمالی در مردان

سوزش یا درد هنگام ادرار

ترشح از مجرای ادرار

درد یا تورم بیضه در برخی موارد

التهاب مجرای ادرار

بسیاری از عفونت‌ها ممکن است بدون علامت باشند؛ بنابراین تشخیص صرفاً بر اساس علائم بالینی کافی نیست.

روش عملکرد کیت Truenat CT/NG

این کیت از فناوری Real-Time Duplex PCR برای شناسایی اهداف ژنتیکی دو باکتری استفاده می‌کند.

مرحله اول: جمع‌آوری نمونه

نمونه بالینی بر اساس جنسیت بیمار و محل احتمالی عفونت انتخاب می‌شود.

مرحله دوم: آماده‌سازی و استخراج DNA

استخراج DNA با استفاده از دستگاه Trueprep AUTO v2 و کارتریج‌های سازگار انجام می‌شود.

مرحله سوم: آماده‌سازی واکنش PCR

۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده به میکروتیوب حاوی معرف‌های لیوفیلیزه اضافه می‌شود.

مرحله چهارم: اجرای آزمون

محلول واکنش به تراشه اختصاصی Truenat CT/NG منتقل شده و در دستگاه Truelab قرار می‌گیرد.

مرحله پنجم: شناسایی مولکولی

تکثیر و شناسایی اهداف ژنتیکی با استفاده از Real-Time PCR و شیمی TaqMan انجام می‌شود.

ژن‌های هدف کیت Truenat CT/NG

یکی از ویژگی‌های مهم این کیت، استفاده از اهداف ژنتیکی اختصاصی برای هر دو باکتری است.

اهداف مولکولی Chlamydia trachomatis

Cryptic Plasmid DNA

ناحیه‌ای از پلاسمید اختصاصی کلامیدیا تراکوماتیس که برای شناسایی مولکولی این باکتری استفاده می‌شود.

ompA Gene

ژن ompA کدکننده پروتئین اصلی غشای خارجی باکتری است و در مطالعات مولکولی کلامیدیا اهمیت دارد.

اهداف مولکولی Neisseria gonorrhoeae

porB Gene

ژن porB کدکننده یکی از پروتئین‌های پورین غشای خارجی نایسریا گونوره‌آ است.

opaE Gene

ژن opaE از اهداف مولکولی معرفی‌شده توسط سازنده برای شناسایی نایسریا گونوره‌آ است.

استفاده از اهداف ژنتیکی اختصاصی به شناسایی مولکولی عوامل بیماری‌زا کمک می‌کند.

مشخصات فنی کیت Truenat CT/NG

نام محصول: Truenat® CT/NG

شرکت سازنده: Molbio Diagnostics

عامل‌های هدف: Chlamydia trachomatis و Neisseria gonorrhoeae

نوع ماده ژنتیکی: DNA

روش تشخیص: Chip-Based Real-Time Duplex PCR

شیمی واکنش: TaqMan

نوع آزمون: Semi-Quantitative Detection

زمان کل آزمون: ۶۰ دقیقه

حجم محلول استخراج‌شده: ۶ میکرولیتر

روش استخراج: Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction

دستگاه استخراج: Trueprep AUTO v2

ژن‌های هدف CT: Cryptic Plasmid DNA و ompA

ژن‌های هدف NG: porB و opaE

کنترل داخلی: Internal Process Control – Extraction Control

حساسیت اعلام‌شده سازنده: ۱۰۰ درصد

ویژگی اعلام‌شده سازنده: ۱۰۰ درصد

حد تشخیص کلامیدیا: 274.67 copies/mL

حد تشخیص سوزاک: 264.65 copies/mL

شرایط نگهداری: ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

پایداری معرف‌ها: تا دو سال طبق شرایط تعیین‌شده سازنده

نمونه‌های قابل استفاده

بر اساس اطلاعات رسمی Molbio Diagnostics، نمونه‌های مورد استفاده در کیت Truenat CT/NG شامل موارد زیر هستند.

نمونه‌های زنان

سواب اندوسرویکال (Endocervical Swab)

نمونه‌برداری از کانال دهانه رحم.

سواب واژینال (Vaginal Swab)

نمونه‌برداری از واژن.

نمونه ادرار (Urine)

نمونه ادرار زنان مطابق دستورالعمل جمع‌آوری نمونه.

نمونه‌های مردان

سواب مجرای ادرار (Urethral Swab)

نمونه‌برداری از مجرای ادرار مردان.

نمونه ادرار (Urine)

نمونه ادرار مردان مطابق دستورالعمل جمع‌آوری نمونه.

استفاده از نمونه‌های حلقی یا رکتال در مشخصات این محصول ذکر نشده است؛ بنابراین نباید بدون اعتبارسنجی و مجوز مناسب، این نمونه‌ها را جزو کاربردهای تأییدشده کیت معرفی کرد.

حد تشخیص کیت Truenat CT/NG

حد تشخیص یا Limit of Detection پایین‌ترین غلظت هدف است که آزمون می‌تواند تحت شرایط اعتبارسنجی مشخص شناسایی کند.

حد تشخیص کلامیدیا تراکوماتیس

274.67 copies/mL

حد تشخیص نایسریا گونوره‌آ

264.65 copies/mL

این مقادیر به عملکرد تحلیلی کیت مربوط هستند و نباید با حد کمی‌سازی یا دقت اندازه‌گیری بار باکتریایی یکسان در نظر گرفته شوند.

حساسیت و ویژگی آزمون

شرکت Molbio Diagnostics برای کیت Truenat CT/NG حساسیت و ویژگی ۱۰۰ درصد را اعلام کرده است.

این مقادیر مربوط به داده‌های ارائه‌شده توسط سازنده هستند و نباید به معنای تضمین عملکرد صددرصدی در تمام نمونه‌ها و شرایط بالینی تلقی شوند.

کیفیت نمونه‌گیری، شرایط انتقال، مقدار DNA عامل بیماری‌زا و سایر عوامل پیش‌تحلیلی ممکن است بر نتیجه آزمایش تأثیر بگذارند.

ده ویژگی اصلی کیت Truenat CT/NG

۱. تشخیص هم‌زمان دو عامل بیماری‌زا

شناسایی Chlamydia trachomatis و Neisseria gonorrhoeae در یک آزمون دوگانه.

۲. فناوری Real-Time Duplex PCR

استفاده از واکنش PCR مبتنی بر تراشه و شیمی TaqMan.

۳. تشخیص نیمه‌کمی

آزمون برای شناسایی نیمه‌کمی DNA دو باکتری طراحی شده است.

۴. زمان پاسخ‌دهی حدود ۶۰ دقیقه

امکان دستیابی به نتیجه در زمان کوتاه‌تر نسبت به بسیاری از فرایندهای آزمایشگاهی چندمرحله‌ای.

۵. نیاز به ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

حجم کم محلول استخراج‌شده موردنیاز برای واکنش PCR.

۶. پشتیبانی از چند نوع نمونه

سازگاری با نمونه‌های ادرار و سواب‌های تناسلی مشخص‌شده توسط سازنده.

۷. معرف‌های لیوفیلیزه

معرف‌های PCR به‌صورت خشک‌شده انجمادی ارائه می‌شوند.

۸. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

استفاده از تراشه و اقلام مصرفی اختصاصی برای هر آزمون.

۹. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی بچ تولید است.

۱۰. نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

امکان نگهداری معرف‌ها تا دو سال در شرایط تعیین‌شده توسط سازنده.

محتویات کیت Truenat CT/NG

هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل اقلام زیر است.

تراشه اختصاصی PCR

Truenat CT/NG Micro-PCR Chip

میکروتیوب معرف

Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents

نوک سمپلر فیلتر‌دار

DNase and RNase-Free Filter Barrier Microtip

بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

مواد مصرفی مکمل

برای اجرای آزمایش، علاوه بر کیت اصلی، مواد مصرفی زیر معرفی شده‌اند:

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

Trueprep AUTO Transport Medium for Swab Specimen

انتخاب مواد مصرفی باید متناسب با نوع نمونه و دستورالعمل رسمی سازنده انجام شود.

دستگاه‌های سازگار

Trueprep AUTO v2

دستگاه استخراج خودکار اسید نوکلئیک با استفاده از کارتریج.

Truelab Uno Dx

دستگاه تشخیص مولکولی مبتنی بر تراشه.

Truelab Duo

سیستم Real-Time PCR سازگار با تراشه‌های Truenat.

Truelab Quattro

از دیگر تجهیزات خانواده Truelab برای اجرای آزمون‌های سازگار.

بسته‌بندی و شماره کاتالوگ

کیت Truenat CT/NG در بسته‌بندی‌های زیر معرفی شده است:

بسته ۵ تستی: 601160005

بسته ۲۰ تستی: 601160020

بسته ۲۵ تستی: 601160025

بسته ۵۰ تستی: 601160050

این شماره‌ها بر اساس اطلاعات رسمی منتشرشده توسط شرکت Molbio Diagnostics هستند.

کاربردهای بالینی کیت Truenat CT/NG

تشخیص عفونت کلامیدیا

کمک به شناسایی DNA کلامیدیا تراکوماتیس در نمونه‌های تناسلی و ادرار.

تشخیص عفونت سوزاک

کمک به شناسایی DNA نایسریا گونوره‌آ در نمونه‌های تأییدشده.

بررسی عفونت‌های بدون علامت

امکان شناسایی مولکولی عوامل بیماری‌زا در افراد بدون علامت، مطابق اندیکاسیون‌های بالینی.

تشخیص عفونت هم‌زمان

کمک به شناسایی هم‌زمان کلامیدیا و سوزاک در یک فرایند آزمایشگاهی.

کمک به تشخیص افتراقی اورتریت و سرویسیت

ارائه اطلاعات مولکولی تکمیلی برای بررسی علل عفونی التهاب مجرای ادرار و دهانه رحم.

تفاوت آزمایش مولکولی CT/NG با کشت میکروبی

آزمایش مولکولی بر شناسایی DNA عامل بیماری‌زا استوار است.

در مقابل، کشت میکروبی بر رشد میکروارگانیسم زنده در شرایط مناسب آزمایشگاهی متکی است.

آزمون‌های تقویت اسید نوکلئیک (NAAT) از روش‌های مهم تشخیص کلامیدیا و سوزاک هستند.

بااین‌حال، در برخی شرایط، به‌ویژه هنگام بررسی شکست درمان یا مقاومت آنتی‌بیوتیکی سوزاک، کشت و آزمایش حساسیت دارویی همچنان اهمیت دارند.

کیت Truenat CT/NG آزمون تعیین حساسیت آنتی‌بیوتیکی نیست.

تفاوت CT/NG با کیت‌های تک‌عاملی

آزمون‌های تک‌عاملی فقط یک عامل بیماری‌زا را بررسی می‌کنند.

در مقابل، کیت Truenat CT/NG برای شناسایی هر دو عامل کلامیدیا و سوزاک در یک آزمون طراحی شده است.

این ویژگی می‌تواند به کاهش تعداد فرایندهای آزمایشگاهی جداگانه کمک کند؛ هرچند انتخاب آزمون باید بر اساس نیاز بالینی و امکانات آزمایشگاه باشد.

ملاحظات تفسیر نتایج

نتیجه مثبت نشان‌دهنده شناسایی DNA عامل بیماری‌زا در نمونه بررسی‌شده است.

نتیجه منفی لزوماً تمام موارد عفونت را رد نمی‌کند؛ زیرا زمان نمونه‌گیری، کیفیت نمونه و مقدار ماده ژنتیکی می‌توانند بر نتیجه تأثیر بگذارند.

آزمون مولکولی مثبت پس از درمان نیز ممکن است در برخی شرایط ناشی از باقی‌ماندن اسید نوکلئیک غیرزنده باشد؛ بنابراین زمان‌بندی آزمایش پیگیری اهمیت دارد.

تشخیص عفونت در یک محل آناتومیک نیز لزوماً وضعیت عفونت در سایر محل‌های بدن را مشخص نمی‌کند.

تفسیر نتایج باید مطابق دستورالعمل‌های معتبر و شرایط بالینی بیمار انجام شود.

جمع‌بندی

کیت Truenat CT/NG شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون مولکولی نیمه‌کمی برای شناسایی هم‌زمان Chlamydia trachomatis و Neisseria gonorrhoeae است.

این کیت با استفاده از فناوری Chip-Based Real-Time Duplex PCR و شیمی TaqMan، اهداف ژنتیکی اختصاصی هر دو باکتری را شناسایی می‌کند.

نمونه‌های قابل استفاده شامل سواب اندوسرویکال و واژینال زنان، سواب مجرای ادرار مردان و نمونه ادرار زنان و مردان هستند.

زمان کل آزمون حدود ۶۰ دقیقه، حجم محلول استخراج‌شده ۶ میکرولیتر و حد تشخیص اعلام‌شده برای کلامیدیا و سوزاک به‌ترتیب 274.67 و 264.65 copies/mL است.

سازگاری با دستگاه Trueprep AUTO v2 و تجهیزات خانواده Truelab، معرف‌های لیوفیلیزه و شرایط نگهداری ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از ویژگی‌های اصلی محصول هستند.

این کیت می‌تواند به تشخیص مولکولی دو عامل مهم عفونت‌های منتقله از راه جنسی در آزمایشگاه‌های مجهز کمک کند.