کیت Truenat Mgen مولبایو | تشخیص مولکولی مایکوپلاسما ژنیتالیوم با Real-Time PCR
معرفی کیت Truenat Mgen
کیت Truenat® Mgen محصول شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی نیمه‌کمی مبتنی بر فناوری Chip-Based Real-Time PCR است که برای شناسایی DNA باکتری Mycoplasma genitalium در نمونه‌های ادراری‌تناسلی طراحی شده است.
این کیت برای بررسی نمونه‌های سواب مجرای ادرار، سواب واژینال، سواب دهانه رحم و ادرار کاربرد دارد و می‌تواند به تشخیص عفونت‌های علامت‌دار و بدون علامت ناشی از این باکتری کمک کند.
فناوری Truenat با استفاده از دستگاه استخراج خودکار Trueprep AUTO v2 و تجهیزات مولکولی خانواده Truelab امکان اجرای آزمایش را در یک پلتفرم کم‌حجم فراهم می‌کند.
زمان کل آزمون حدود ۶۰ دقیقه است و برای انجام واکنش PCR تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده موردنیاز است.
مایکوپلاسما ژنیتالیوم چیست؟
Mycoplasma genitalium یک باکتری کوچک و فاقد دیواره سلولی است که می‌تواند از طریق تماس جنسی منتقل شود.
این باکتری یکی از عوامل شناخته‌شده اورتریت غیرگونوکوکی، به‌ویژه اورتریت پایدار یا عودکننده در مردان، محسوب می‌شود.
در زنان نیز عفونت مایکوپلاسما ژنیتالیوم با التهاب دهانه رحم و بیماری التهابی لگن ارتباط دارد.
بسیاری از افراد آلوده ممکن است بدون علامت باشند؛ بنابراین تشخیص عفونت صرفاً بر اساس علائم بالینی امکان‌پذیر نیست.
علائم عفونت Mycoplasma genitalium
علائم احتمالی در زنان
ترشحات غیرطبیعی واژن
سوزش هنگام ادرار
درد زیر شکم یا لگن
خون‌ریزی غیرطبیعی یا پس از رابطه جنسی
التهاب دهانه رحم
درد هنگام رابطه جنسی
علائم احتمالی در مردان
سوزش هنگام ادرار
ترشح از مجرای ادرار
التهاب مجرای ادرار
تداوم یا عود علائم اورتریت
بخش قابل‌توجهی از عفونت‌ها ممکن است بدون علامت باشند.
اهمیت تشخیص مولکولی Mgen
تشخیص مایکوپلاسما ژنیتالیوم به دلایل مختلف اهمیت دارد.
این باکتری می‌تواند در ایجاد عفونت‌های پایدار یا عودکننده دستگاه ادراری‌تناسلی نقش داشته باشد.
همچنین مقاومت آنتی‌بیوتیکی، به‌ویژه مقاومت به ماکرولیدها، یکی از چالش‌های مهم درمان عفونت Mgen است.
ازآنجاکه کشت این باکتری دشوار و زمان‌بر است، آزمون‌های تقویت اسید نوکلئیک یا NAAT نقش مهمی در تشخیص آن دارند.
شناسایی DNA باکتری می‌تواند به پزشک در انتخاب مسیر بررسی و درمان مناسب کمک کند.
روش عملکرد کیت Truenat Mgen
کیت Truenat Mgen از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر تراشه و شیمی TaqMan استفاده می‌کند.
مرحله اول: جمع‌آوری نمونه
نمونه بالینی مناسب از دستگاه ادراری‌تناسلی بیمار جمع‌آوری می‌شود.
مرحله دوم: استخراج DNA
استخراج DNA با دستگاه Trueprep AUTO v2 و کارتریج‌های آماده‌سازی نمونه انجام می‌شود.
مرحله سوم: آماده‌سازی واکنش
۶ میکرولیتر از محلول استخراج‌شده به میکروتیوب حاوی معرف‌های لیوفیلیزه PCR اضافه می‌شود.
مرحله چهارم: اجرای آزمایش
محلول آماده‌شده به تراشه اختصاصی Truenat Mgen منتقل شده و در دستگاه Truelab قرار می‌گیرد.
مرحله پنجم: تحلیل نتیجه
دستگاه با بررسی سیگنال‌های فلورسانس و کنترل داخلی، نتیجه شناسایی هدف مولکولی را ارائه می‌کند.
هدف مولکولی کیت Truenat Mgen
بر اساس مشخصات رسمی Molbio Diagnostics، هدف مولکولی این کیت ناحیه‌ای مرتبط با:
Hypothetical Protein (IgG-Blocking Protein M)
است.
این هدف برای شناسایی اختصاصی DNA باکتری Mycoplasma genitalium در واکنش Real-Time PCR استفاده می‌شود.
در اطلاعات عمومی سازنده، نام دقیق ژن به‌صورت یک شناسه ژنومی استاندارد ارائه نشده است؛ بنابراین بهتر است در مشخصات محصول، همان عنوان رسمی سازنده درج شود.
مشخصات فنی کیت Truenat Mgen
نام محصول: Truenat® Mgen
شرکت سازنده: Molbio Diagnostics
عامل هدف: Mycoplasma genitalium
نوع عامل بیماری‌زا: باکتری فاقد دیواره سلولی
نوع ماده ژنتیکی: DNA
روش تشخیص: Chip-Based Real-Time PCR
شیمی واکنش: TaqMan
نوع آزمون: Semi-Quantitative Detection
روش استخراج: Microfluidics Cartridge-Based Automated Extraction
دستگاه استخراج: Trueprep AUTO v2
زمان کل آزمون: ۶۰ دقیقه
حجم محلول استخراج‌شده: ۶ میکرولیتر
هدف مولکولی: Hypothetical Protein (IgG-Blocking Protein M)
کنترل داخلی: Internal Process Control – Extraction Control
حد تشخیص (LoD): 636.05 copies/mL
حساسیت اعلام‌شده سازنده: 100%
ویژگی اعلام‌شده سازنده: 100%
دمای نگهداری: ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد
پایداری معرف‌ها: تا دو سال در شرایط تعیین‌شده سازنده
نمونه‌های قابل استفاده
طبق اطلاعات رسمی سازنده، کیت Truenat Mgen برای بررسی نمونه‌های زیر طراحی شده است.
سواب مجرای ادرار
Urethral Swab
سواب واژینال
Vaginal Swab
سواب دهانه رحم
Cervical
Swab
نمونه ادرار
Urine Specimen
شرایط جمع‌آوری، حجم نمونه، محیط انتقال و روش آماده‌سازی باید مطابق آخرین دستورالعمل رسمی کیت رعایت شوند.
حد تشخیص کیت Truenat Mgen
حد تشخیص یا Limit of Detection نشان‌دهنده کمترین غلظت هدف مولکولی است که آزمون می‌تواند در شرایط اعتبارسنجی مشخص شناسایی کند.
حد تشخیص اعلام‌شده برای این کیت برابر است با:
636.05 copies/mL
این مقدار مربوط به عملکرد تحلیلی آزمون است و نباید به‌عنوان حد کمی‌سازی یا حداقل بار باکتریایی قابل اندازه‌گیری دقیق معرفی شود.
حساسیت و ویژگی آزمون
شرکت Molbio Diagnostics برای کیت Truenat Mgen حساسیت و ویژگی ۱۰۰ درصد را گزارش کرده است.
این اعداد باید در چارچوب ارزیابی انجام‌شده توسط سازنده تفسیر شوند و به معنای تضمین عملکرد صددرصدی در تمام جمعیت‌ها و نمونه‌های بالینی نیستند.
کیفیت نمونه‌گیری، شرایط نگهداری، مقدار DNA باکتری و رعایت دستورالعمل آزمایش می‌توانند بر نتیجه تأثیر بگذارند.
ده ویژگی اصلی کیت Truenat Mgen
۱. شناسایی اختصاصی Mycoplasma genitalium
تشخیص مستقیم DNA باکتری عامل عفونت‌های ادراری‌تناسلی.
۲. فناوری Real-Time PCR
استفاده از آزمون مولکولی مبتنی بر تراشه و شیمی TaqMan.
۳. تشخیص نیمه‌کمی
ارائه نتیجه در قالب آزمون Semi-Quantitative بدون ادعای اندازه‌گیری مطلق بار باکتریایی.
۴. زمان پاسخ‌دهی حدود ۶۰ دقیقه
امکان دستیابی به نتیجه در حدود یک ساعت طبق اطلاعات سازنده.
۵. نیاز به ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده
حجم کم ماده استخراج‌شده موردنیاز برای اجرای PCR.
۶. سازگاری با نمونه‌های مختلف
پشتیبانی از سواب‌های ادراری‌تناسلی و نمونه ادرار.
۷. معرف‌های لیوفیلیزه
معرف‌های PCR به‌صورت خشک‌شده انجمادی عرضه می‌شوند.
۸. تراشه و اقلام مصرفی یک‌بارمصرف
طراحی مناسب برای اجرای آزمون‌های مستقل.
۹. کنترل داخلی فرایند
وجود کنترل داخلی برای بررسی عملکرد مراحل آزمایش.
۱۰. نگهداری در دمای ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد
پایداری معرف‌ها تا دو سال در شرایط توصیه‌شده.
محتویات کیت Truenat Mgen
طبق فهرست رسمی سازنده، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل موارد زیر است:
۱. تراشه اختصاصی PCR
Truenat Mgen Micro-PCR Chip
۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های PCR
Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents
۳. نوک سمپلر فیلتر‌دار
DNase/RNase-Free Filter Barrier Pipette Tip
۴. بسته رطوبت‌گیر
Desiccant Pouch
۵. دستورالعمل استفاده
Package Insert
مواد مصرفی مکمل
برای اجرای آزمایش، علاوه بر کیت اصلی، اقلام زیر موردنیاز هستند:
Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack
Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit
مواد مصرفی و روش آماده‌سازی باید با نوع نمونه و آخرین IFU محصول مطابقت داشته باشند.
دستگاه‌های سازگار
Trueprep AUTO v2
دستگاه استخراج خودکار اسید نوکلئیک مبتنی بر کارتریج.
Truelab Uno Dx
دستگاه تشخیص مولکولی مبتنی بر تراشه.
Truelab Duo
دستگاه اجرای Real-Time PCR سازگار با کیت‌های Truenat.
Truelab Quattro
سیستم تشخیص مولکولی چهارجایگاهی خانواده Truelab.
بسته‌بندی و شماره کاتالوگ
کیت Truenat Mgen در سه ظرفیت اصلی عرضه می‌شود.
بسته ۵ تستی: 601490005
بسته ۲۵ تستی: 601490025
بسته ۵۰ تستی: 601490050
شماره‌های فوق مطابق فهرست رسمی سازنده هستند.
کاربردهای بالینی کیت Truenat Mgen
بررسی اورتریت پایدار یا عودکننده
Mycoplasma genitalium یکی از عوامل مهم اورتریت غیرگونوکوکی است و بررسی آن در بیماران دارای علائم پایدار یا عودکننده اهمیت دارد.
بررسی سرویسیت
این باکتری می‌تواند با التهاب دهانه رحم در زنان ارتباط داشته باشد.
ارزیابی بیماران مشکوک به عفونت Mgen
آزمون مولکولی در بیماران دارای علائم سازگار با عفونت می‌تواند به تشخیص کمک کند.
بررسی عفونت‌های بدون علامت در موارد دارای اندیکاسیون
کیت توانایی شناسایی DNA باکتری در افراد بدون علامت را دارد؛ بااین‌حال، غربالگری روتین تمام افراد بدون علامت توصیه عمومی محسوب نمی‌شود.
کمک به تشخیص افتراقی
این آزمون می‌تواند در کنار آزمایش‌های اختصاصی کلامیدیا، سوزاک و تریکوموناس به بررسی علت علائم ادراری‌تناسلی کمک کند.
تفاوت Mgen با کلامیدیا و سوزاک
مایکوپلاسما ژنیتالیوم، کلامیدیا تراکوماتیس و نایسریا گونوره‌آ هر سه می‌توانند عفونت‌های دستگاه ادراری‌تناسلی ایجاد کنند.
بااین‌حال، این عوامل از نظر ساختار میکروبی، روش‌های درمان و الگوهای مقاومت دارویی تفاوت دارند.
مایکوپلاسما ژنیتالیوم فاقد دیواره سلولی است و بنابراین آنتی‌بیوتیک‌هایی که بر ساخت دیواره سلولی باکتری اثر می‌گذارند، مانند بتالاکتام‌ها، علیه آن مؤثر نیستند.
کیت Truenat Mgen فقط برای شناسایی Mycoplasma genitalium طراحی شده است و جایگزین کیت‌های CT/NG نیست.
تفاوت آزمایش PCR با کشت Mycoplasma genitalium
کشت Mycoplasma genitalium دشوار و بسیار زمان‌بر است و معمولاً برای تشخیص روتین استفاده نمی‌شود.
در مقابل، روش‌های مولکولی مانند PCR با شناسایی مستقیم DNA باکتری، امکان تشخیص سریع‌تر را فراهم می‌کنند.
به همین دلیل، آزمون‌های تقویت اسید نوکلئیک از روش‌های اصلی تشخیص Mgen محسوب می‌شوند.
آیا کیت Truenat Mgen مقاومت آنتی‌بیوتیکی را مشخص می‌کند؟
خیر.
کیت Truenat Mgen برای شناسایی DNA باکتری طراحی شده است و در مشخصات رسمی آن قابلیت تعیین جهش‌های مقاومت به ماکرولیدها یا فلوروکینولون‌ها ذکر نشده است.
بنابراین نتیجه مثبت این آزمون به‌تنهایی وضعیت حساسیت یا مقاومت دارویی باکتری را مشخص نمی‌کند.
در صورت نیاز به بررسی مقاومت، باید از آزمون‌های اعتبارسنجی‌شده مناسب استفاده شود.
نکات مهم در تفسیر نتایج
نتیجه مثبت نشان‌دهنده شناسایی DNA مایکوپلاسما ژنیتالیوم در نمونه بررسی‌شده است.
نتیجه منفی لزوماً عفونت را در تمام شرایط رد نمی‌کند؛ زیرا کیفیت نمونه‌گیری، مقدار DNA و زمان انجام آزمایش بر نتیجه تأثیر دارند.
همچنین آزمایش مولکولی ممکن است پس از درمان، برای مدتی DNA باقی‌مانده از باکتری را شناسایی کند.
بنابراین انجام آزمایش پیگیری باید با زمان‌بندی مناسب و مطابق دستورالعمل‌های بالینی انجام شود.
نتیجه این آزمون نباید به‌تنهایی برای تعیین نوع آنتی‌بیوتیک استفاده شود.
جمع‌بندی
کیت Truenat Mgen شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون تشخیص مولکولی نیمه‌کمی برای شناسایی DNA باکتری Mycoplasma genitalium در نمونه‌های ادراری‌تناسلی است.
این محصول از فناوری Chip-Based Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan استفاده می‌کند و با دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 و تجهیزات Truelab Uno Dx، Duo و Quattro سازگار است.
زمان کل آزمون حدود ۶۰ دقیقه، حجم محلول استخراج‌شده موردنیاز ۶ میکرولیتر و حد تشخیص اعلام‌شده 636.05 copies/mL است.
پشتیبانی از نمونه‌های سواب مجرای ادرار، واژن، دهانه رحم و ادرار، معرف‌های لیوفیلیزه و شرایط نگهداری ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد از ویژگی‌های اصلی محصول هستند.
کیت Truenat Mgen می‌تواند به تشخیص مولکولی عفونت Mycoplasma genitalium در آزمایشگاه‌های مجهز به پلتفرم Truenat کمک کند.