Truenat® MTB-RIF Dx

کیت Truenat® MTB-RIF Dx | تشخیص مولکولی مقاومت به ریفامپیسین در بیماری  سل مورد تایید سازمان بهداشت جهانی WHO

معرفی کیت Truenat MTB-RIF Dx

کیت Truenat® MTB-RIF Dx محصول شرکت Molbio Diagnostics، یک آزمون مولکولی مبتنی بر تراشه و فناوری Real-Time PCR است که برای شناسایی مقاومت به آنتی‌بیوتیک ریفامپیسین (Rifampicin) در نمونه‌های انسانی مثبت از نظر مایکوباکتریوم توبرکلوزیس طراحی شده است.

این کیت در نمونه‌هایی کاربرد دارد که نتیجه آزمون Truenat MTB یا Truenat MTB Plus آن‌ها مثبت بوده است.

آزمون با شناسایی جهش‌های تک‌نوکلئوتیدی (SNPs) مهم در ژنوم مایکوباکتریوم توبرکلوزیس که با مقاومت به ریفامپیسین ارتباط دارند، به ارزیابی مقاومت دارویی و تشخیص سل مقاوم به چند دارو (MDR-TB) کمک می‌کند.

سل مقاوم به ریفامپیسین چیست؟

سل مقاوم به ریفامپیسین (Rifampicin-Resistant Tuberculosis یا RR-TB) زمانی ایجاد می‌شود که سویه‌های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس نسبت به ریفامپیسین، یکی از داروهای مهم خط اول درمان سل، مقاومت پیدا کنند.

طبق اطلاعات درج‌شده در صفحه رسمی محصول Molbio، در سال ۲۰۲۰ نزدیک به نیم میلیون نفر در جهان به سل مقاوم به ریفامپیسین مبتلا شده‌اند.

شناسایی مقاومت به ریفامپیسین نقش مهمی در تصمیم‌گیری درمانی و بررسی احتمال سل مقاوم به چند دارو دارد. بااین‌حال، مقاومت به ریفامپیسین به‌تنهایی اثبات‌کننده مقاومت هم‌زمان به ایزونیازید نیست.

بار جهانی بیماری

شرکت Molbio کشورهای زیر را از مناطق دارای بار بالای بیماری سل معرفی کرده است:

هند

اندونزی

چین

فیلیپین

پاکستان

نیجریه

بنگلادش

آفریقای جنوبی

ویژگی‌های کلیدی کیت Truenat MTB-RIF Dx

۱. نیاز به تنها ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده

برای انجام واکنش، تنها 6 µL از محلول نهایی استخراج‌شده (Eluate) موردنیاز است.

۲. دستیابی به نتیجه در ۷۰ دقیقه

زمان اعلام‌شده از نمونه تا نتیجه (Sample-to-Result) برابر با ۷۰ دقیقه است.

۳. مواد مصرفی یک‌بارمصرف

کیت از مواد مصرفی یک‌بارمصرف با کاربری آسان استفاده می‌کند.

۴. طراحی مقاوم در برابر آلودگی و تبخیر

ساختار مواد مصرفی و تراشه با هدف کاهش احتمال آلودگی و تبخیر در حین انجام واکنش طراحی شده است.

۵. معرف‌های PCR لیوفیلیزه

معرف‌های واکنش PCR به‌صورت خشک‌شده انجمادی (Lyophilized) و آماده مصرف ارائه می‌شوند.

۶. پایداری معرف‌ها تا دو سال

طبق اعلام سازنده، معرف‌ها در محدوده دمایی ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد تا دو سال پایداری دارند.

۷. نیازمندی‌های حداقلی ایمنی زیستی

شرکت سازنده حداقل نیازمندی‌های ایمنی زیستی را از ویژگی‌های پلتفرم معرفی کرده است. این ویژگی جایگزین رعایت الزامات ایمنی زیستی هنگام کار با نمونه‌های سل نیست.

۸. تراشه هوشمند

تراشه دارای اطلاعات اختصاصی هر بچ تولید (Batch-Specific Data) است.

۹. فناوری TaqMan

آزمون از فناوری Real-Time PCR مبتنی بر شیمی TaqMan استفاده می‌کند.

۱۰. طراحی پرایمرها با حساسیت و اختصاصیت بالا

طبق اطلاعات سازنده، پرایمرها برای دستیابی به حساسیت و اختصاصیت بالا طراحی شده‌اند.

مشخصات فنی کیت (Technical Specifications)

روش استخراج (Extraction Method)

استخراج خودکار ماده ژنتیکی با فناوری میکروفلوئیدیک و کارتریج در دستگاه Trueprep AUTO v2 انجام می‌شود.

Microfluidics Cartridge Based Automated Extraction

روش آزمون (Assay Method)

Real-Time PCR based on TaqMan Chemistry followed by Melt-Curve Assay

آزمون از PCR در زمان واقعی مبتنی بر TaqMan و سپس تحلیل منحنی ذوب (Melt-Curve Analysis) استفاده می‌کند.

نوع آزمون (Assay Type)

Qualitative Detection — شناسایی کیفی

این کیت برای بررسی وجود جهش‌های مرتبط با مقاومت به ریفامپیسین طراحی شده است، نه اندازه‌گیری کمی بار باکتریایی.

زمان کل آزمون (Total Assay Time)

۷۰ دقیقه

نمونه بالینی (Clinical Specimen)

MTB-Positive Human Specimen

نمونه انسانی مثبت از نظر مایکوباکتریوم توبرکلوزیس.

ژن هدف (Gene Target)

RRDR Region of the rpoB Gene

ناحیه تعیین‌کننده مقاومت به ریفامپیسین (Rifampicin Resistance-Determining Region یا RRDR) در ژن rpoB هدف مولکولی این آزمون است.

جهش‌های این ناحیه می‌توانند با مقاومت باکتری به ریفامپیسین ارتباط داشته باشند.

کنترل داخلی (Internal Controls)

Internal Process Control – Extraction Control

کنترل داخلی فرایند و استخراج برای پایش عملکرد مراحل آزمون در نظر گرفته شده است.

حساسیت تشخیصی (Sensitivity)

۱۰۰٪

مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی سازنده.

ویژگی تشخیصی (Specificity)

۹۶٪

مقدار اعلام‌شده در صفحه رسمی سازنده.

این اعداد باید با توجه به روش و جمعیت مطالعه اعتبارسنجی تفسیر شوند.

حد تشخیص (Limit of Detection – LoD)

200 cells/mL of Sputum

۲۰۰ سلول در هر میلی‌لیتر خلط.

د

مای نگهداری (Kit Storage Temperature)

۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد

محتویات کیت Truenat MTB-RIF Dx

طبق اطلاعات رسمی شرکت Molbio، هر بسته تکی مهروموم‌شده شامل اقلام زیر است:

۱. تراشه میکرو PCR

Truenat® MTB-RIF Dx Micro-PCR Chip

تراشه اختصاصی انجام واکنش مولکولی.

۲. میکروتیوب حاوی معرف‌های PCR

Microtube with Freeze-Dried PCR Reagents

میکروتیوب حاوی معرف‌های خشک‌شده انجمادی.

۳. نوک سمپلر فیلتردار

DNase and RNase-Free Filter Barrier Microtip

نوک سمپلر فیلتردار فاقد DNase و RNase.

۴. بسته رطوبت‌گیر

Desiccant Pouch

برای محافظت از محتویات بسته در برابر رطوبت.

اطلاعات سفارش و شماره کاتالوگ (Ordering Information)

کیت Truenat MTB-RIF Dx در چهار اندازه بسته‌بندی معرفی شده است.

بسته ۵ تستی

Pack Size: 5T

Cat. No.: 601210005

بسته ۲۰ تستی

Pack Size: 20T

Cat. No.: 601210020

بسته ۲۵ تستی

Pack Size: 25T

Cat. No.: 601210025

بسته ۵۰ تستی

Pack Size: 50T

Cat. No.: 601210050

مواد مصرفی موردنیاز (Other Consumables Required)

علاوه بر اقلام داخل بسته کیت، مواد مصرفی زیر موردنیاز هستند:

بسته پیش‌تیمار نمونه Trueprep AUTO

Trueprep AUTO Universal Sample Pre-treatment Pack

برای مرحله پیش‌تیمار و آماده‌سازی نمونه.

کیت آماده‌سازی نمونه کارتریجی

Trueprep AUTO v2 Universal Cartridge-Based Sample Prep Kit

برای آماده‌سازی و استخراج خودکار ماده ژنتیکی.

دستگاه‌های موردنیاز (Devices Required)

دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2

برای استخراج خودکار ماده ژنتیکی از نمونه.

دستگاه‌های PCR سازگار Truelab

Truelab Uno Dx

Truelab Duo

Truelab Quattro

دستگاه دوکاناله Truelab Duo و دستگاه استخراج Trueprep AUTO v2 از جمله تجهیزاتی هستند که در پلتفرم مولکولی Molbio برای اجرای آزمون استفاده می‌شوند.

تفاوت Truenat MTB-RIF Dx با MTB و MTB Plus

کیت‌های Truenat MTB و Truenat MTB Plus برای شناسایی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس طراحی شده‌اند.

در مقابل، Truenat MTB-RIF Dx برای بررسی جهش‌های مرتبط با مقاومت به ریفامپیسین در نمونه‌هایی استفاده می‌شود که قبلاً از نظر MTB مثبت شده‌اند.

بنابراین این آزمون نقش تکمیلی در بررسی مقاومت دارویی دارد و جایگزین تست اولیه تشخیص سل نیست.

همچنین کیت Truenat MTB-RIF Dx با کیت Truenat MTB-INH تفاوت دارد؛ زیرا MTB-INH برای بررسی مقاومت مرتبط با ایزونیازید طراحی شده است.

جمع‌بندی

کیت Truenat® MTB-RIF Dx شرکت Molbio Diagnostics یک آزمون کیفی مبتنی بر Real-Time PCR و تحلیل منحنی ذوب برای بررسی جهش‌های مرتبط با مقاومت به ریفامپیسین در ژن rpoB مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است.

این کیت برای نمونه‌های انسانی مثبت از نظر MTB کاربرد دارد و طبق اطلاعات سازنده، نتیجه آن در حدود ۷۰ دقیقه ارائه می‌شود.

از مشخصات مهم این محصول می‌توان به حد تشخیص 200 cells/mL of Sputum، حساسیت اعلام‌شده ۱۰۰٪، ویژگی اعلام‌شده ۹۶٪، نیاز به ۶ میکرولیتر محلول استخراج‌شده و شرایط نگهداری ۲ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد اشاره کرد.

این کیت در بسته‌های ۵، ۲۰، ۲۵ و ۵۰ تستی عرضه می‌شود و با سیستم استخراج Trueprep AUTO v2 و دستگاه‌های Truelab سازگار است.